Různé požadavky na molekulární kyslík můžeme snadno pozorovat při pěstování bakterií v thioglykolátových zkumavkových kulturách. Zkumavková kultura začíná s autoklávovaným thioglykolátovým médiem obsahujícím nízký podíl agaru, aby se pohyblivé bakterie mohly pohybovat po celém médiu. Thioglykolát má silné redukční vlastnosti a autoklávování z něj vyplaví většinu kyslíku. Do zkumavek se naočkují testované bakteriální kultury a inkubují se při vhodné teplotě. V průběhu času kyslík pomalu difunduje shora do celé zkumavkové kultury thioglykolátu. Hustota bakterií se zvyšuje v oblasti, kde je koncentrace kyslíku nejvhodnější pro růst daného organismu.
Růst bakterií s různými nároky na kyslík v thioglykolátových zkumavkách je znázorněn na obrázku 7.10. Ve zkumavce A je veškerý růst vidět v horní části zkumavky. Bakterie jsou obligátní (striktní) aeroby, které nemohou růst bez hojného přísunu kyslíku. Zkumavka B vypadá jako opak zkumavky A. Bakterie rostou ve spodní části zkumavky B. Jedná se o obligátní anaeroby, které kyslík zabíjí. Zkumavka C vykazuje silný růst v horní části zkumavky a růst v celé zkumavce, což je typický výsledek u fakultativních anaerobů. Fakultativní anaeroby jsou organismy, kterým se daří v přítomnosti kyslíku, ale rostou i v jeho nepřítomnosti, přičemž se spoléhají na fermentaci nebo anaerobní dýchání, pokud je k dispozici jiný vhodný akceptor elektronů než kyslík a organismus je schopen anaerobního dýchání. Aerotolerantním anaerobům ve zkumavce D je přítomnost kyslíku lhostejná. Nevyužívají kyslík, protože mají obvykle fermentativní metabolismus, ale přítomnost kyslíku jim neškodí jako obligátním anaerobům. Zkumavka E vpravo ukazuje kulturu „Goldilocks“. Hladina kyslíku musí být pro růst tak akorát, ne příliš mnoho a ne příliš málo. Tyto mikroaerofily jsou bakterie, které ke svému růstu potřebují minimální hladinu kyslíku, přibližně 1-10 %, což je mnohem méně než 21 %, které se vyskytují v atmosféře.
- Očekávali byste, že nejstarší bakteriální linie budou aerobní nebo anaerobní?
- Které bakterie rostou v horní části thioglykolátové trubice a které rostou ve spodní části trubice?
.