Chování a kultivace bakterií
Nejběžnější barvení
Jednoduché barvení
Barvení v gramech
Protože jsou bakterie malé, průhledné a bezbarvé, je často nemožné je vidět pod mikroskopem bez nějakého barvení. Barvivo je skvělý způsob, jak bakterie obarvit, aby byly lépe vidět, a také je identifikovat a uspořádat. Existují 2 hlavní typy barvení, kterými můžete bakterie obarvit – jednoduché barvení a barvení podle Grama.
Při jednoduchém barvení chcete bakterie upevnit na podložní sklíčko pomocí správné techniky roztírání. Tím zajistíte, že budete mít tenkou vrstvu a jen malé množství, jinak bude velmi obtížné je pod mikroskopem najít. Poté bakterie obarvíte na barvu. Mezi běžná barviva patří methylenová modř, krystalová violeť a bazický fuchsin. Tato barviva mají speciální buňky zvané chromofory, což jsou ionty nesoucí barvu a bývají mírně pozitivní. Bakterie mají tendenci být mírně negativní, takže se obě látky přitahují, což umožňuje, aby barvivo na bakterii ulpělo. Toto barvivo se používá hlavně k lepšímu zobrazení organismů.
Naproti tomu můžete použít také barvení podle Grama. Christian Gram vytvořil Gramovo barvení v roce 1884 a od té doby se používá dodnes. Gramovo barvení rozděluje organismy do dvou kategorií – grampozitivní nebo gramnegativní. Gram pozitivní se zbarví fialově nebo modře, zatímco Gram negativní se zbarví růžově nebo červeně. K obarvení organismů se používá barvivo krystalová violeť a podle barvy, kterou se organismus zbarví, lze zjistit základní charakteristiky organismu. Hlavní rozdíl mezi oběma skupinami je založen na tom, z čeho se skládají jejich buněčné stěny. Grampozitivní bakterie mají buněčnou stěnu složenou z peptidoglykanu, zatímco gramnegativní bakterie mají buněčnou stěnu složenou z polysacharidů a lipidů. I když je toto barvení dobrým počátečním krokem při uspořádání a zařazení bakterií do skupin, ne vždy funguje. Existuje několik bakterií, které se mohou barvit jak negativně, tak pozitivně, a jiné se nebarví vůbec.
Jak vidíte na těchto fotografiích, gramnegativní bakterie se zbarví červeně (vpravo) a grampozitivní bakterie se zbarví modře nebo fialově (vlevo).
Bakterie se zbarví modře nebo fialově.