Alai

Zajímají vás chemiluminiscenční ELISA testy, ale nevíte přesně, co jsou zač nebo jak je používat? Naše video Srovnání kolorimetrických a chemiluminiscenčních ELISA testů pojednává o tom, jak jsou si tyto dva typy testů podobné a jak mohou vylepšit vaše laboratorní testování.

Podívejte se na naše video:

• Poznejte, jak chemiluminiscenční a kolorimetrické ELISA měří biomarkery
• Prozkoumejte různé typy čteček destiček používaných k provádění jednotlivých testů
• Srovnejte součásti jednotlivých testů

Srovnání kolorimetrických a chemiluminiscenčních ELISA

Přepis videa

Dobrý den, Jsem Christi Caillouette ze společnosti ALPCO! Dnes vás provedu srovnáním kolorimetrických a chemiluminiscenčních enzymově vázaných imunosorbentních testů, nazývaných také ELISA.

Princip sendvičových ELISA

Ačkoli existuje mnoho typů testů, ELISA, o kterých se dnes budu zmiňovat, jsou sendvičové testy. Sendvičové ELISA testy mají na destičce nanesenou protilátku, která se specificky váže na požadovaný analyt. Po promytí se přidá detekční protilátka a enzymová značka, která se váže na analyt. Pro vytvoření reakce v jamkách se přidá substrát. V závislosti na typu testu se vytvoří buď barva, nebo světlo. Tuto reakci lze měřit pomocí destičkové čtečky. Stupeň změny barvy nebo emitovaného světla indikuje množství analytu ve vzorku.

Měření neznámých koncentrací biomarkerů

Oba kolorimetrické a chemiluminiscenční testy používají známé standardy k vytvoření standardní křivky pro měření neznámé koncentrace analytu ve vzorcích. V závislosti na soupravě se toho dosahuje pomocí softwarových programů se 4 nebo 5parametrovými algoritmy logistického přizpůsobení křivky. Oba typy souprav poskytují uživateli měření analytu velmi podobným způsobem.

Výstup kolorimetrických ELISA

Kolorimetrické ELISA vyžadují standardní čtečku mikrotitračních destiček pro detekci reakce změny barvy mezi značkou enzymu a substrátem. Čtečka vysílá přes každou jamku vlnovou délku, obvykle 450 nm, aby určila optickou hustotu neboli „OD“ vzorku. V závislosti na destičkové čtečce se hodnoty OD pohybují mezi 0 a 4 na tisícinu desetinného místa. Hodnoty OD jsou omezeny kapacitou spektrofotometru.

Výstup chemiluminiscenčních ELISA

Chemiluminiscenční ELISA vyžaduje čtečku mikrotitračních destiček schopnou měřit luminiscenci k detekci světelné reakce mezi značkou enzymu a substrátem. Světlo vyzařované reakcí v jamkách je přenášeno optickým kabelem do fotonásobiče ve čtečce, který vydává relativní světelné jednotky neboli „RLU“. V závislosti na destičkové čtečce se mohou jednotky RLU pohybovat v rozmezí stovek až milionů. Toto rozpětí jednotek poskytuje uživatelům lepší analytickou citlivost a širší dynamický rozsah tím, že poskytuje větší odstup mezi body a snižuje omezení odečtu optické hustoty ze standardní čtečky mikrodestiček.

Kolorimetrické vs. chemiluminiscenční ELISA

Nyní vám ukážu, co se obecně nachází v našich krabičkách kolorimetrických a chemiluminiscenčních souprav ELISA a jak se tyto soupravy jen nepatrně liší. Ukážu vám kolorimetrickou soupravu ELISA pro lidský inzulin společnosti ALPCO a naši chemiluminiscenční soupravu ELISA pro GLP-1 (7-36) amid společnosti STELLUX.

Kolorimetrická souprava ELISA pro lidský inzulin

Nejprve začneme kolorimetrickou soupravou ELISA pro lidský inzulin společnosti ALPCO. V tomto kolorimetrickém testu obdržíte:

• 96 jamkovou mikrotitrační destičku – destička je průhledná, aby bylo možné měřit OD barvy v destičce
• Nulový standard
• Standardy, A až E – každá lahvička obsahuje známé hodnoty inzulinu pro stanovení standardní křivky
• Kontroly – obsahují známé hodnoty inzulinu pro kontrolu kvality.
• Detekční protilátka značená enzymem
• Koncentrát promývacího pufru
• TMB substrát – který během inkubace mění barvu jamek na modrou.
• Zastavovací roztok – který se přidává k zastavení reakce změny barvy v jamkách, čímž se jamky změní na žluté.
• A utěsňovače destiček

Součásti soupravy STELLUX® Chemiluminiscence Active GLP-1 (7-36) amid ELISA

Dále máme soupravu ALPCO STELLUX® Chemi Active GLP-1 (7-36) amid ELISA. V tomto chemiluminiscenčním testu obdržíte:

• Aktivní GLP-1 96jamkovou mikrodestičku – Všimněte si, že chemi destička je černá místo čiré. Černá destička snižuje interferenci světla na pozadí při čtení destičky.
• Standardy
• Kontrolní hladiny
• Testovací pufr
• Detektorová protilátka
• Pufr detektorové protilátky
• Koncentrát promývacího pufru
• Streptavidin-HRP – který funguje jako značka enzymu.
• Streptavidin-HRP pufr – který se používá k ředění streptavidinu-HRP na pracovní sílu.
• Chemiluminiscenční substrát A
• Chemiluminiscenční substrát B – které se kombinují, aby vznikl chemiluminiscenční substrát pracovní síly, který interaguje s enzymovou značkou a vytváří chemiluminiscenční reakci v každé jamce.
• Těsnicí prostředky na destičky

Závěr

Jak vidíte, některá činidla se mezi kolorimetrickými a chemiluminiscenčními testy ELISA liší, ale princip každého testu je podobný a oba umožňují měřit koncentraci neznámých analytů ve vzorcích. Ať už používáte kolorimetrické soupravy, nebo máte zájem vyzkoušet naše chemiluminiscenční testy, máme něco pro vás. Společnost ALPCO je zde, aby vám pomohla prozkoumat možnosti vaší laboratoře. Chcete-li si prohlédnout naši kompletní nabídku testů ELISA, navštivte naše webové stránky. Máme mnoho skvělých zdrojů, které vám pomohou s vašimi projekty, takže si je prosím prohlédněte.

Děkujeme za sledování!

Chcete-li se dozvědět více o produktech společnosti ALPCO, kontaktujte Roberta Somogyiho na adrese [email protected].

.