Alai

Naším dlouhodobým cílem je zkoumat mechanismy sekrece a působení sekretinu a cholecystokininu (CCK), abychom lépe pochopili fyziologii a patofyziologii těchto dvou střevních hormonů. Tento návrh má ověřit dvě hlavní hypotézy: 1) uvolňování sekretinu a cholecystokininu je luminálně zprostředkováno uvolňujícími faktory vylučovanými ze sliznice horní části tenkého střeva a působení těchto dvou hormonů na exokrinní sekreci pankreatu je řízeno hormony pankreatických ostrůvků včetně inzulínu, pankreatického polypeptidu, somatostatinu a glukagonu. Pankreatická šťáva nebo proteázy v horní části tenkého střeva potlačují uvolňování jak CCK a/nebo sekretinu, tak pankreatickou exokrinní sekreci v interdigestivní a/nebo intestinální fázi. Bylo zjištěno, že zpětnovazební regulace exokrinního pankreatu pozorovaná u potkanů, psů a lidí je hormonálně zprostředkovaná. Tato pozorování naznačují přítomnost trypsin-senzitivních uvolňujících faktorů pro oba hormony. Uvolňující faktory se nacházejí v horní části střevní sekrece potkanů jako peptidy citlivé na trypsin. Přítomnost těchto faktorů bude dále potvrzena u potkana a psa. Nejprve bude ze střevního kyselého perfuzátu nebo extraktu potkanů a psů izolován faktor uvolňující sekretin (S-RF) a přečištěn na homogenitu. Bude stanovena jejich primární struktura. Následně budou izolovány a purifikovány faktory uvolňující CCK (CCK-RF) a bude určena jejich struktura. Oba faktory budou syntetizovány na zakázku a bude vyvinuta jejich specifická radioimunoanalýza. Poté bude zkoumán mechanismus uvolňování S-RF nebo CCK-RF a jejich působení in vivo a in vitro. U potkanů při vědomí imunoneutralizace cirkulujícího inzulínu králičím antiinzulínovým sérem zcela potlačuje exokrinní sekreci pankreatu stimulovanou tekutým jídlem nebo exogenním sekretinem a CCK-8. V případě potkanů při vědomí je možné, že se inzulín a CCK-8 v cirkulaci zcela ztratí. Rovněž potlačuje uvolňování sekretinu a CCK. Vliv inzulinu na působení sekretinu a CCK bude zkoumán u potkanů, psů a lidí, jakož i u zvířat a pacientů s diabetes mellitus. Studie bude rozšířena na modely izolovaného perfundovaného pankreatu normálních a diabetických potkanů a psů, aby se objasnil mechanismus účinku inzulínu a role 3 pankreatických inhibičních hormonů na exokrinní pankreas. Navrhovaná studie obohatí základní poznatky o fyziologii a patofyziologii sekretinu a CCK a o exokrinní funkci pankreatu a také nám pomůže lépe zvládnout pacienty s poruchou trávicí a absorpční funkce a s diabetem.