Při testování regulovaných výrobků, jako jsou léčiva (na předpis i volně prodejná), zdravotnické prostředky, doplňky stravy nebo dokonce kosmetika, musí použité zkušební metody splňovat určité výkonnostní požadavky, jinak výsledky získané při použití metod nebudou regulačními orgány, jako je FDA, akceptovány. Způsob, jak určit spolehlivost analytické metody, je provést validaci metody. Je třeba poznamenat, že Validace metody vs. Ověření metody vs. Převod metody se vztahují nejen na testování regulovaných výrobků, ale také na testování složek, z nichž se regulované výrobky skládají, a obalů, v nichž jsou distribuovány.
Co je validace metody?
Farmakopej Spojených států amerických (USP) definuje validaci metody jako proces, při kterém se prostřednictvím laboratorních studií zjišťuje, že výkonnostní charakteristiky metody splňují požadavky na její zamýšlené analytické aplikace. USP dále uvádí, že validace metody obvykle hodnotí následující analytické charakteristiky metody: Přesnost, preciznost, specifičnost, mez detekce, mez kvantifikace, linearita, rozsah a robustnost. V závislosti na typu metody a jejím použití nebudou pro validaci vyžadovány všechny výše uvedené analytické charakteristiky.
Přesnost se týká blízkosti výsledků testů získaných analytickou metodou ke skutečné hodnotě. Přesnost metody musí být stanovena v celém rozsahu jejího použití.
Přesnost je definována jako stupeň shody mezi jednotlivými výsledky zkoušek, když je metoda opakovaně použita na více odběrů homogenního vzorku.
Specifičnost je schopnost metody jednoznačně vyhodnotit analyt v přítomnosti složek, jejichž přítomnost se očekává, jako jsou nečistoty, produkty rozkladu, jiné složky a další možné interference matrice.
Meze detekce je charakteristika používaná pro limitní zkoušky a týká se nejnižšího množství analytu ve vzorku, které lze detekovat, ale ne nutně kvantifikovat.
Kvantifikační limit je charakteristika kvantitativních zkoušek pro nízké hladiny sloučenin v matricích vzorků, jako jsou nečistoty a degradační produkty. Je to nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze metodou stanovit s přijatelnou přesností a správností.
Linearita je schopnost metody generovat výsledky, které jsou přímo úměrné koncentraci analytu ve vzorcích v celém rozsahu použití metody.
Rozsah analytické metody je definován jako interval mezi horní a dolní hladinou analytu, který poskytuje vhodnou přesnost, správnost a linearitu.
Robustnost je mírou schopnosti metody zůstat neovlivněna malými, ale záměrnými změnami procesních parametrů.
Specifické podrobnosti týkající se validace metody lze nalézt v obecné kapitole USP <1225> nazvané „Validace kompendiálních postupů“.
Musí být metody USP validovány?
Neexistuje žádný obecný požadavek, aby metody USP byly validovány, protože byly úspěšně validovány před jejich zařazením do USP. Vyžaduje se však, aby vhodnost metod USP byla stanovena za skutečných podmínek použití, tj. pro konkrétní zkoušený vzorek a laboratoří, která zkoušku provádí. Metody USP a obecně Compendial metody (např. BP a EP) musí být ověřeny.
.