Bei der Prüfung von regulierten Produkten wie Arzneimitteln (verschreibungspflichtig und rezeptfrei), Medizinprodukten, Nahrungsergänzungsmitteln oder sogar Kosmetika müssen die eingesetzten Testmethoden bestimmte Leistungsanforderungen erfüllen, sonst werden die mit den Methoden erzielten Ergebnisse von Regulierungsbehörden wie der FDA nicht akzeptiert. Die Zuverlässigkeit einer Analysemethode lässt sich durch eine Methodenvalidierung feststellen. Es ist zu beachten, dass Methodenvalidierung vs. Methodenverifizierung vs. Methodentransfer nicht nur für die Prüfung von regulierten Produkten gilt, sondern auch für die Prüfung der Inhaltsstoffe, aus denen regulierte Produkte bestehen, und der Behälter, in denen sie vertrieben werden.
Was ist Methodenvalidierung?
Die United States Pharmacopeia (USP) definiert Methodenvalidierung als ein Verfahren, bei dem durch Laboruntersuchungen festgestellt wird, dass die Leistungsmerkmale einer Methode die Anforderungen für die beabsichtigten analytischen Anwendungen erfüllen. In der USP heißt es weiter, dass bei der Methodenvalidierung in der Regel die folgenden analytischen Merkmale einer Methode bewertet werden: Genauigkeit, Präzision, Spezifität, Nachweisgrenze, Quantifizierungsgrenze, Linearität, Bereich und Robustheit. Je nach Art der Methode und ihrer Anwendung sind nicht alle der oben genannten analytischen Merkmale für die Validierung erforderlich.
Ungenauigkeit bezieht sich auf die Übereinstimmung der mit einer analytischen Methode erzielten Testergebnisse mit dem wahren Wert. Die Genauigkeit einer Methode muss über ihren gesamten Anwendungsbereich bestimmt werden.
Präzision ist definiert als der Grad der Übereinstimmung zwischen einzelnen Testergebnissen, wenn die Methode wiederholt auf mehrere Proben einer homogenen Probe angewandt wird.
Spezifität ist die Fähigkeit einer Methode, den Analyten in Gegenwart von erwarteten Komponenten wie Verunreinigungen, Abbauprodukten, anderen Inhaltsstoffen und anderen möglichen Matrixinterferenzen eindeutig zu bestimmen.
Die Nachweisgrenze ist ein Merkmal, das auf Grenzwerttests angewandt wird, und bezieht sich auf die geringste Menge des Analyten in einer Probe, die nachgewiesen, aber nicht unbedingt quantifiziert werden kann.
Die Quantifizierungsgrenze ist ein Merkmal quantitativer Assays für geringe Mengen von Verbindungen in Probenmatrizes, wie Verunreinigungen und Abbauprodukte. Sie ist die niedrigste Menge des Analyten in einer Probe, die mit der Methode mit akzeptabler Präzision und Genauigkeit bestimmt werden kann.
Linearität ist die Fähigkeit einer Methode, Ergebnisse zu erzeugen, die direkt proportional zur Konzentration des Analyten in den Proben über den Anwendungsbereich der Methode sind.
Der Bereich einer Analysemethode ist definiert als das Intervall zwischen dem oberen und dem unteren Gehalt des Analyten, das eine geeignete Präzision, Genauigkeit und Linearität ergibt.
Robustheit ist ein Maß für die Fähigkeit einer Methode, von kleinen, aber absichtlichen Variationen der Verfahrensparameter unbeeinflusst zu bleiben.
Spezifische Einzelheiten zur Methodenvalidierung finden sich im Allgemeinen Kapitel <1225> der USP mit dem Titel „Validation of Compendial Procedures“.
Müssen USP-Methoden validiert werden?
Es gibt keine allgemeine Anforderung, dass USP-Methoden validiert werden müssen, da sie vor ihrer Aufnahme in die USP erfolgreich validiert wurden. Es ist jedoch erforderlich, dass die Eignung der USP-Methoden unter den tatsächlichen Anwendungsbedingungen, d. h. für die spezifische zu prüfende Probe und durch das prüfende Laboratorium, bestimmt wird. USP-Methoden und Compendial-Methoden im Allgemeinen (z.B. BP und EP) müssen verifiziert werden.
