Effet de Digibind™ et DigiFab™ sur la mesure de la digoxine sérique
Digibind et DigiFab sont des fragments Fab d’anticorps anti-digoxine utilisés dans le traitement d’un surdosage aigu de digoxine menaçant le pronostic vital. Digibind, le premier antidote disponible pour le traitement des surdoses de digoxine, est disponible aux États-Unis depuis 1986 (Glaxo Wellcome Inc.), et plus récemment, en 2001, la Food and Drug Administration des États-Unis (FDA) a approuvé DigiFab pour le traitement des surdoses de digoxine. Le Digibind est produit par l’immunisation de moutons avec un conjugué digoxine-albumine humaine, suivie de l’isolement de l’anticorps spécifique de la digoxine dans le sang et de la digestion à la papaïne pour générer le fragment Fab de l’anticorps. Le fragment Fab de l’anticorps antidigoxine est ensuite purifié. Le DigiFab est préparé en injectant à des moutons de la digoxine-dicarboxyméthylamine, un analogue de la digoxine, puis en isolant l’anticorps antidigoxine du sang, en le digérant avec de la papaïne et en purifiant le fragment Fab par chromatographie d’affinité. Le poids moléculaire de DigiFab (46 000 Da) est similaire à celui de Digibind (46 200 Da). Habituellement, la dose de Digibind correspond à 80 fois la charge corporelle de digoxine ; si l’on ne connaît ni la dose ingérée ni la concentration plasmatique de digoxine, on injecte généralement 380 mg de Digibind au patient. La demi-vie du fragment Fab chez l’homme est de 12 à 20 heures, mais elle peut être prolongée chez les patients souffrant d’insuffisance rénale. Digibind et DigiFab sont équivalents dans leur capacité de liaison à la digoxine. De plus, les deux composés sont capables de lier le DLIS endogène .
En plus de la digoxine, Digibind démontre la capacité de neutraliser le cardénolide qui est glycosylé en position 3 (digitoxine et ouabaïne) avec une puissance similaire, indépendamment des substitutions dans la partie stéroïde de la molécule. Par conséquent, Digibind est efficace pour traiter l’intoxication végétale par la digitale, qui contient divers glycosides cardiaques. Rich et al. ont démontré le succès du traitement par Digibind d’un homme de 22 ans qui avait été victime d’une surdose intentionnelle d’un extrait de digitale fait maison. De plus, Digibind est capable de neutraliser à la fois les glycosides cardiaques et leurs aglycones respectifs – par exemple l’oléandrine, le composant actif de l’extrait de laurier-rose – et est efficace pour traiter la toxicité mortelle du laurier-rose. En outre, Digibind peut être efficace dans le traitement du surdosage de Chan Su – Chan Su étant un médicament chinois contenant de la bufaline et d’autres stéroïdes cardioactifs de la classe des bufadiénolides – mais l’efficacité de Digibind dans le traitement de l’empoisonnement au Chan Su est faible par rapport à son efficacité dans le traitement du surdosage en digoxine. Cela est dû à la faible spécificité de Digibind pour neutraliser la cinobufagine et la cinobufatoline, qui sont également des constituants du Chan Su, tout comme le venin de crapaud .
Digibind et DigiFab interfèrent tous deux avec la mesure de la digoxine sérique à l’aide d’immunodosages. L’ampleur de l’interférence dépend de la conception du dosage et de la spécificité de l’anticorps antidigoxine. Le dosage immunoenzymatique de la digoxine par microparticules (MEIA sur l’analyseur AxSYM, Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) ainsi que le dosage de la digoxine par Stratus ont montré des valeurs de digoxine supérieures à la concentration de digoxine libre mesurée en présence de Digibind . McMillin et al. ont étudié l’effet de Digibind et DigiFab sur 13 différents tests immunologiques de la digoxine. Une interférence positive en présence et en absence de digoxine a été observée avec Digibind et DigiFab, bien que l’ampleur de l’interférence ait été un peu moins importante avec DigiFab. L’ampleur de l’interférence a varié de manière significative avec chaque méthode, alors que les méthodes IMMULITE®, Vitros®, Dimension® et Access® digoxin ont montré l’interférence la plus élevée. Des interférences minimes ont été observées avec les méthodes FPIA, MEIA, SYNCHRON et CEDIA. Les auteurs ont également fait remarquer que le suivi de la digoxine libre (dans l’ultrafiltrat sans protéines) élimine cette interférence car Digibind et DigiFab, en raison de leur poids moléculaire approximatif de 46 000 Da, sont tous deux absents de l’ultrafiltrat sans protéines . Digibind et DigiFab n’interfèrent pas avec la mesure de la digoxine sérique par une méthode chromatographique, telle que la chromatographie liquide combinée à la spectrométrie de masse. Kanno et al. ont décrit une méthode d’analyse simultanée de la digoxine, de la digitoxine et des composés apparentés par chromatographie liquide combinée à la spectrométrie de masse en tandem. Oiestad et al. ont également décrit une méthode de chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) pour la digoxine et la digitoxine dans le sang total pour les cas d’autopsie. Les échantillons ont été préparés par extraction liquide-liquide à l’aide d’acétate d’éthyle/heptane/dichlorométhane (3 : 1 : 1 par volume), et les séparations chromatographiques ont été réalisées à l’aide d’une colonne C-18 en phase inverse. La détection de masse a été effectuée par électrospray en mode d’ions positifs sur des adduits d’ammonium, et la digoxine deutérée (digoxine-d3) a été utilisée comme étalon interne. Cependant, les méthodes chromatographiques sont rarement utilisées dans les laboratoires cliniques, bien que les laboratoires de toxicologie médico-légale et les laboratoires de criminologie impliqués dans les enquêtes sur les décès soient équipés de tels analyseurs.