Abstract
Un Labrador mâle de cinq ans a été présenté aux cliniques vétérinaires d’enseignement de GADVASU avec une plainte primaire d’abdomen distendu, de fièvre et d’anorexie. Le chien a été trouvé maussade avec une température rectale élevée (104°F), une fréquence cardiaque (148 par minute) et une fréquence respiratoire (58 par minute). L’examen du frottis sanguin et le test PCR ont révélé que le chien était positif pour Babesia gibsoni. Des taux élevés de bilirubine, d’alanine aminotransférase (ALT), de phosphatase alcaline (ALP), de créatinine, d’azote uréique du sang (BUN), de numération leucocytaire totale, d’hypoalbuminémie et d’hypoprotéinémie constituaient des altérations hématobiochimiques. La radiographie et l’échographie ont montré respectivement un aspect de verre dépoli et une zone anéchogène de l’abdomen.
1. Introduction
La babésiose canine est l’une des plus importantes maladies hémoprotozoaires mortelles transmises par les tiques chez les chiens, causée par des parasites protozoaires intraérythrocytaires du genre Babesia qui sont signalés dans le monde entier et dans diverses régions de l’Inde, y compris l’État du Pendjab . La prévalence variable de B. canis et B. gibsoni a été observée en Inde (0,66 à 21,7%) et à Ludhiana la prévalence a été enregistrée à 5,26 pour cent . La pathogénie de la babésiose canine varie selon les régions, probablement en raison de la variation de la pathogénicité des différentes souches de l’espèce Babesia dans diverses conditions écologiques. La gravité de la babésiose est liée à l’ampleur de la réplication du parasite dans les globules rouges de l’hôte, suivie d’une lyse cellulaire. Une grande variété de signes cliniques tels que l’anorexie, la léthargie, l’ictère, les vomissements et une perte marquée de l’état corporel ont été observés, ainsi que des anomalies clinicopathologiques variables, notamment l’hémoglobinurie, l’hypoglycémie, les troubles acido-basiques, l’azotémie et l’élévation des taux d’enzymes hépatiques . En outre, B. gibsoni provoque une anémie hémolytique régénérative et une thrombocytopénie. Une sphérocytose et des résultats positifs au test de Coombs direct suggèrent une composante immunomédiate. La thrombocytopénie est fréquente. Dans la présente communication, nous décrivons les observations clinico-hématobiochimiques, radiographiques et échographiques dans un cas très rare d’épanchement péritonéal dû à l’effet pathogène de l’infection par Babesia gibsoni.
2. Description du cas
Un chien labrador mâle de cinq ans a été présenté à l’hôpital d’enseignement vétérinaire de l’Université des sciences vétérinaires et animales Guru Angad Dev, Ludhiana, juillet 2013, avec une distension abdominale et une anorexie persistante depuis deux jours. Le chien présentait un mauvais état corporel. Lors de l’examen physique, le chien était pyrétique (104°F), avec une fréquence cardiaque de 148 battements par minute et une fréquence respiratoire de 58 respirations par minute. Les muqueuses étaient pâles. Des tiques ont été retirées du chien et ont été identifiées comme étant Rhipicephalus sanguineus.
Des échantillons de sang ont été soumis à des analyses hématologiques et biochimiques sériques.
2.1. Analyse hématologique et biochimique
L’analyse hématologique et biochimique a révélé une anémie modérée à sévère avec une élévation de la bilirubine, de l’alanine amino transférase (ALT), de la phosphatase alcaline (ALP), de la créatinine, de l’azote uréique du sang (BUN), de la numération leucocytaire totale, une hypoalbuminémie et une hypoprotéinémie qui sont des altérations hématobiochimiques (tableau 1). L’insuffisance hépatique chronique en cas de babésiose pourrait entraîner une hypoalbuminémie. Les paramètres hématologiques suggéraient que le chien pouvait avoir des parasites sanguins ou d’autres maladies infectieuses pertinentes. La pathogenèse de l’anémie semble impliquer des mécanismes non hémolytiques et hémolytiques. L’hémolyse peut impliquer des protéases produites par le parasite envahisseur, une réaction immunitaire aux cellules parasitées, et/ou des dommages oxydatifs aux érythrocytes. Les valeurs de MCV, MCH et MCHC étaient juste à la limite de la plage normale (tableau 1), ce qui indique que l’anémie n’était pas due à une carence en fer, mais les MCV et MCHC ne permettent souvent pas de différencier correctement les différents types d’anémie. L’anomalie la plus courante était la thrombocytopénie. La raison de la thrombocytopénie dans la babésiose pourrait être due à la séquestration des plaquettes dans la rate ou à la destruction des plaquettes à médiation immunitaire et au développement de la coagulation intravasculaire disséminée .
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2.2. Examen parasitologique
Afin de distinguer ces possibilités, l’examen microscopique de frottis sanguins minces colorés au Giemsa et préparés à partir de la marge de l’oreille a été effectué sous une lentille à immersion d’huile (100x). L’examen a révélé la présence d’organismes en forme d’anneau, d’ovale, de parachute et de virgule, d’environ 1-3 μm de diamètre dans les érythrocytes (figure 1). Sur la base de la taille des parasites intracellulaires dans ce cas, la possibilité que le chien ait été infecté par de petites Babesia spp, en particulier par B. gibsoni, a été envisagée. Le degré de parasitémie, calculé comme le pourcentage de globules rouges infectés en comptant 1000 globules rouges, était de 10,5%. Les tiques présentes sur le chien ont été identifiées comme étant Rhipicephalus sanguineus. Le fait que B. gibsoni ne puisse pas être distingué des autres isolats de petites babésies canines par microscopie nous a incités à réaliser une PCR pour le diagnostic final en utilisant l’amorce spécifique de B. gibsoni .
2.3. Extraction d’ADN
L’ADN du sang total (300 μL) a été extrait à l’aide du kit de purification d’ADN (QIAGEN, GmbH, Allemagne) conformément aux instructions du fabricant.
Un ensemble d’amorces comprenant une amorce directe (Gib599 F) : 5′CTCGGCTACTTGCCTTGTC3′ et une amorce inverse (Gib1270R) : 5′GCCGAAACTGAAATAACGGC 3′ a été utilisé pour amplifier un fragment de 671 pb de la région du gène de l’ARNr 18 S spécifique à B. gibsoni . Le mélange PCR était composé d’une concentration molaire 1X de 12,5 µL de mélange maître (tampon PCR 1X QIAGEN, 2,5 unités d’ADN polymérase Taq, 200 µM de chaque dNTP et 1,5 mM MgCl2), 1,5 µL de 10 pmol de chacune des amorces respectives et 5 µL de matrice comme source d’ADN.
Après une dénaturation initiale à 95°C pendant 5 min, 30 cycles de dénaturation (94°C pendant 45 sec), de recuit (57°C pendant 1 min) et d’extension (72°C pendant 1 min) ont été réalisés et l’extension finale a été effectuée à 72°C pendant 8 min. Un contrôle d’échantillon négatif (ADN de sang canin uniquement) et un contrôle d’ADN négatif (eau Milli-Q en remplacement de l’ADN) ont été inclus dans la réaction PCR. Les produits PCR ont été passés sur un gel d’agarose à 1,5 % et colorés avec du bromure d’éthidium. La taille du produit PCR amplifié était de 671 pb (Figure 2).
2.4. Analyse du liquide péritonéal
Sur la base d’une distension abdominale, une ascite a été suspectée. Une tabulation péritonéale a été effectuée et 2 ml de liquide péritonéal clair ont été recueillis. Le liquide péritonéal a typiquement été examiné pour la couleur, la turbidité, la concentration en protéines totales et en albumine. Le fluide était transparent et clair. Les protéines totales et l’albumine étaient respectivement de 0,4 g/dL et 0,2 g/dL, indiquant une hypoprotéinémie (0,4 g/dL) et une hypoalbuminémie (0,2 g/dL).
2.5. Radiographie et échographie
La radiographie et l’échographie ont montré un aspect de verre dépoli et une zone anéchogène de l’abdomen, respectivement (figures 3 et 4). Le cas a donc été confirmé comme étant une ascite. Bien que les signes cliniques les plus courants de la babésiose soient l’anorexie, la léthargie, la fièvre récurrente, la pâleur des muqueuses et les vomissements, nos résultats ont révélé qu’il est important de ne pas négliger la babésiose dans le diagnostic différentiel de l’ascite. Les chiens présentant une ascite doivent être soumis à un diagnostic parasitologique classique ou moléculaire pour exclure la babésiose. Les organismes Babesia infectent les érythrocytes des chiens, entraînant une anémie hémolytique. L’infection par B. gibsoni est connue pour provoquer des signes cliniques plus graves que l’infection par les grandes Babesia spp. et peut entraîner des syndromes de dysfonctionnement de plusieurs organes. Comme le chien était sévèrement anémié avec d’autres anomalies graves dans les paramètres liés aux organes vitaux, il est mort dans les deux jours suivant le traitement.
3. Conclusion
A notre connaissance, il s’agit du premier rapport de cas d’épanchement péritonéal chez un chien associé à une infection par B. gibsoni diagnostiqué par examen microscopique et réaction en chaîne par polymérase (PCR) en combinaison avec l’analyse du liquide péritonéal, la radiographie et l’échographie.
Conflit d’intérêts
Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts concernant la publication de cet article.