Effekt af Digibind™ og DigiFab™ på Serum Digoxin Measurement
Digibind og DigiFab er Fab-fragmenter af antidigoxin-antistof, der anvendes til behandling af en livstruende akut overdosis af digoxin. Digibind, den første antidot til behandling af digoxinoverdosis, har været tilgængelig i USA siden 1986 (Glaxo Wellcome Inc.), og for nylig, i 2001, godkendte USA’s Food and Drug Administration (FDA) DigiFab til behandling af digoxinoverdoser. Digibind fremstilles ved at immunisere får med digoxin-human albumin-konjugat efterfulgt af isolering af digoxin-specifikt antistof fra blodet og papainfordøjelse for at generere antistoffets Fab-fragment. Fab-fragmentet af antidigoxin-antistoffet oprenses derefter yderligere. DigiFab fremstilles ved at injicere får med digoxin-dicarboxymethylamin, en digoxin-analog, efterfulgt af isolering af antidigoxin-antistof fra blodet, papainfordøjelse og derefter oprensning af Fab-fragmentet ved hjælp af affinitetskromatografi. DigiFab’s molekylvægt (46 000 Da) svarer til Digibind’s molekylvægt (46 200 Da). Normalt er Digibind-doseringen 80 gange digoxinkropsbelastningen; hvis hverken den indtagne dosis eller plasma-digoxinkoncentrationen er kendt, injiceres der normalt 380 mg Digibind til patienten. Halveringstiden for Fab-fragmentet hos mennesker er 12-20 timer, men den kan være forlænget hos patienter med nyresvigt . Digibind og DigiFab er ækvivalente med hensyn til deres digoxinbindende evne. Desuden er begge forbindelser i stand til at binde endogene DLIS .
Ud over digoxin viser Digibind evnen til at neutralisere cardenolid, der er glykosyleret i position 3 (digitoxin og ouabain) med en lignende styrke, uanset substitutioner i steroiddelen af molekylet. Digibind er derfor effektivt til behandling af planteforgiftning med fingerbøl, som indeholder forskellige kardeglykosider. Rich et al. demonstrerede en vellykket behandling af en 22-årig mand med Digibind, som blev overdoseret forsætligt med et hjemmelavet fingerbølsekstrakt . Desuden er Digibind i stand til at neutralisere både hjerteglykosider og respektive aglykoner – f.eks. oleandrin, den aktive bestanddel af oleanderekstrakt – og er effektivt til behandling af livstruende oleanderforgiftning . Digibind kan desuden være effektivt til behandling af Chan Su-overdosis – Chan Su er et kinesisk lægemiddel, der indeholder bufalin og andre kardioaktive steroider fra bufadienolid-klassen – men Digibinds effektivitet ved behandling af Chan Su-forgiftning er ringe sammenlignet med dets effektivitet ved behandling af digoxin-overdosis. Dette skyldes Digibinds ringe specificitet med hensyn til at neutralisere cinobufagin og cinobufatolin, som også er bestanddele af Chan Su, ligesom paddegift .
Både Digibind og DigiFab interfererer med serumdigoxinmåling ved hjælp af immunoassays. Størrelsen af interferensen afhænger af assaydesignet og specificiteten af antidigoxin-antistoffet. Mikropartikelenzymimmunoassayet for digoxin (MEIA på AxSYM-analysatoren, Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) samt Stratus-digoxinassayet viste digoxinværdier, der var højere end den målte koncentration af frit digoxin i tilstedeværelse af Digibind . McMillin et al. undersøgte virkningen af Digibind og DigiFab på 13 forskellige digoxin-immunoassays. Der blev observeret positiv interferens i tilstedeværelse og fravær af digoxin med Digibind og DigiFab, selv om omfanget af interferensen var noget mindre med DigiFab. Størrelsen af interferensen varierede betydeligt med hver enkelt metode, mens IMMULITE®-, Vitros®-, Dimension®- og Access®-digoxinmetoderne viste den højeste interferens. Der blev observeret minimal interferens med FPIA-, MEIA-, SYNCHRON- og CEDIA-metoderne. Forfatterne bemærkede også, at overvågning af frit digoxin (i det proteinfrie ultrafiltrat) eliminerer denne interferens, fordi både Digibind og DigiFab på grund af deres omtrentlige molekylvægt på 46 000 Da ikke findes i proteinfrit ultrafiltrat . Digibind og DigiFab forstyrrer ikke måling af digoxin i serum ved hjælp af en kromatografisk metode som f.eks. væskekromatografi kombineret med massespektrometri. Kanno et al. har beskrevet en metode til samtidig analyse af digoxin, digitoxin og beslægtede forbindelser ved hjælp af flydende kromatografi kombineret med tandem-massespektrometri . Oiestad et al. beskrev også en metode med flydende kromatografi-tandem-massespektrometri (LC-MS/MS) til bestemmelse af digoxin og digitoxin i fuldblod i obduktionstilfælde. Prøverne blev fremstillet ved væske-væskeekstraktion med ethylacetat/heptan/dichlormethan (3 : 1 : 1 volumenprocent), og de kromatografiske separationer blev opnået ved hjælp af en C-18 omvendtfasekolonne. Massedetektion blev udført ved elektrospray i positiv ionmodus på ammoniumaddukter, og deutereret digoxin (digoxin-d3) blev anvendt som intern standard. Kromatografiske metoder anvendes imidlertid sjældent i kliniske laboratorier, selv om retsmedicinske toksikologiske laboratorier og kriminallaboratorier, der er involveret i dødsundersøgelser, er udstyret med sådanne analysatorer.