Holdning og dyrkning af bakterier
De mest almindelige farvestoffer
Enkle farvestoffer
Gramfarve
Da bakterier er små, gennemsigtige og farveløse, er det ofte umuligt at se dem i mikroskopet uden en eller anden form for farvestof. En plet er en god måde at farve bakterierne på, så de er lettere at se, samt at identificere og organisere dem. Der er 2 hovedtyper af farvninger, som du kan lave på bakterier – en simpel farvning og en Gram-farvning.
I en simpel farvning skal du montere bakterier på et objektglas ved hjælp af korrekt udstrygningsteknik. Dette vil sikre, at du har et tyndt lag og kun en lille mængde, da det ellers vil være meget svært at finde under mikroskopet. Derefter farves bakterierne med en farve. Almindelige farvestoffer omfatter methylenblå, krystalviolet og basisk fuchsin. Farvestofferne har specielle celler kaldet chromophorer, som er farvebærende ioner og har tendens til at være svagt positive. Bakterier har en tendens til at være svagt negative, så de to stoffer tiltrækkes, hvilket gør det muligt for farvestoffet at klæbe til bakterierne. Denne farvestof bruges mest til at se organismerne bedre.
Derimod kan man også bruge en Gram-farve. Christian Gram skabte gramfarven i 1884, og den er blevet brugt lige siden. Gram-farven inddeler organismer i to kategorier – Gram-positive eller Gram-negative. Gram-positive vil få en lilla eller blå farve, mens Gram-negative vil få en lyserød eller rød farve. Man bruger farvestoffet krystalviolet til at farve organismerne, og man kan finde grundlæggende karakteristika ved organismen ud fra den farve, den får. Den største forskel mellem de to grupper er baseret på, hvad deres cellevægge er sammensat af. Grampositive bakterier har en cellevæg, der består af peptidoglykan, mens gramnegative bakterier har en cellevæg, der består af polysaccharider og lipider. Selv om denne farvning er et godt første skridt til at organisere og placere bakterier i grupper, virker den ikke altid. Der er flere bakterier, der kan farves både negativt og positivt, og andre farves slet ikke.
Som du kan se på disse billeder, bliver Gram-negative bakterier røde, (til højre) og Gram-positive bakterier bliver blå eller lilla, (til venstre.)