Eredeti cikk
Jacob Rosenblit, Cláudia Regina Abreu,
Leonel Nulman Szterling, José Mauro Kutner, Nelson Hamerschlak,
Paula Frutuoso, Thelma Regina Silva Stracieri de Paiva,
Orlando da Costa Ferreira Júnior
Evaluation of three methods for hemoglobin measurement in a blood donor setting
Hemotherapy Service, Hospital Israelita Albert Einstein, São Paulo, Brazil
ABSTRACT
CONTEXT: A hemoglobin (Hb) szint a leggyakrabban használt paraméter a véradók vérszegénység jelenlétének szűrésére, a Hb szint mérésének egyik leggyakrabban használt módszere a cianmetahemoglobin fotometriai kimutatásán alapul, ennek a technológiának az alternatívájaként a HemoCue kifejlesztett egy fotometriai módszert, amely az azid-metahemoglobin meghatározásán alapul.
cél: A hemoglobin (Hb) meghatározására szolgáló három módszer teljesítményének értékelése egy vérbankban.
TERVEZÉS: Prospektív vizsgálat vérminták felhasználásával a Hb meghatározására szolgáló módszerek összehasonlítására.
KÖZBESZERZÉS: A tercier egészségügyi ellátórendszerhez tartozó magánintézmény, az Israelita Albert Einstein Kórház Hemoterápiás Szolgálata.
MINTÁK: Sorozatos vérmintákat vettek 259 személytől 1996 márciusa és júniusa között.
MÉRÉSEK: A tesztek teljesítményét és azok összehasonlítását a variációs együtthatók (CV), a lineáris regresszió és az átlagos különbségek elemzésével értékeltük.
Eredmények: A CV a három módszer esetében a következő volt: Coulter 0,68%, Cobas 0,82% és HemoCue 0,69%. A három módszer átlagos Hb-meghatározása között nem volt különbség (p>0,05). A Coulter és a Cobas módszer mutatta a legjobb egyezést, és a HemoCue módszer a Coulter és a Cobas módszerrel összehasonlítva alacsonyabb Hb-meghatározást adott. Úgy tűnik azonban, hogy a HemoCue módszerrel végzett módszerpároknak szűkebbek az egyetértési határai (± 0,78 és ± 1,02), mint a Coulter és Cobas kombinációnak (± 1,13).
Összefoglalás: A három módszer jó egyetértést biztosít a hemoglobin meghatározásához.
KULCSSZAVAK: Hemoglobin. Módszerek. Kvantitatív meghatározás. Berendezés.
BEVEZETÉS
A hemoglobin (Hb) szint a leggyakrabban használt paraméter a véradók vérszegénység szűrésére. Ezt a mérést általában a véradást megelőző klinikai-epidemiológiai interjú során végzik.
A Hb-szint mérésére jelenleg az egyik leggyakrabban használt módszer a cianmetahemoglobin fotometriai kimutatásán alapul, amely a Hb-ből származó stabil vegyület. Emellett a kereskedelemben használatra kész reagensek, valamint a kalibráláshoz szükséges cianmetahemoglobin standard oldat is kapható.
Ezzel a technológiával szemben alternatívaként a HemoCue kifejlesztett egy fotometriai módszert, amely az azid-metahemoglobin meghatározásán alapul,1 és a Nemzetközi Hematológiai Szabványosítási Bizottság (ICSH) módszerével szemben szabványosított.2 Az azid-metahemoglobin mérése 570 nm-en történik. A pl. a lipidek okozta zavarosság kompenzálására egy második mérést végeznek 880 nm-en.3 Ennek a technológiának az az előnye, hogy egyszerű, gyors és nem igényel bonyolult hematológiai felszerelést. A rendszert kapilláris, vénás vagy artériás vér használatára tervezték. Emellett a műszer kicsi és hordozható, ami lehetővé teszi a mobil vérvételi egységekben és orvosi rendelőkben való használatát.
A HemoCue módszer jó reprodukálhatóságát és pontosságát több, amerikai véradókon végzett vizsgálat is igazolta.4,5 A HemoCue módszerrel mért Hb-szint összehasonlíthatóságát más, újabban elérhető hematológiai berendezésekkel azonban nem végezték el.
Ebben a tanulmányban a HemoCue rendszer teljesítményét a Coulter és Cobas módszerekkel összehasonlítva vizsgáltuk. Mindkét módszer a cianmetahemoglobin kimutatásán alapul.
MÓDSZEREK
Minták kiválasztása. Az 1996 márciusa és júniusa közötti időszakban összesen 259 vérmintát gyűjtöttek. A vérvétel Vacutainer rendszerrel történt, EDTA-K3 (Becton-Dickinson) tartalmú, 4,5 ml-es teljes térfogatig.
Hb mérések. A 259 minta esetében a három módszerrel 10-20 perces időközön belül végeztük el, hogy elkerüljük a feldolgozás és a mérés során fellépő eltéréseket. A Hb-mérések reprodukálhatósági elemzéséhez egyetlen mintát használtunk, amelyet minden módszerrel 10-szer értékeltünk ki. E meghatározások alapján kiszámítottuk a variációs együtthatót (CV), amelyet a Hb-szintek szórásának és átlagának 100-zal megszorzott hányadosaként határoztunk meg. A Coulter és a Cobas készülékeket naponta kalibráltuk a gyártó ajánlásának megfelelően. A HemoCue fotométert gyárilag kalibrálták, és azt nem kell újrakalibrálni. A kalibrálást naponta ellenőrizték a gyártó ajánlásának megfelelően. A kalibráció stabil volt a vizsgálati időszakunk alatt.
Statisztikai módszerek. Minden statisztikai elemzést az EPIINFO 6-os verziójú shareware szoftverrel végeztünk (lineáris regresszióelemzés, Student t-próba, az átlag és a szórás kiszámítása).6 A 0,05-nél kisebb p-értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.
eredmények
Az egyes módszerek reprodukálhatóságát úgy értékeltük, hogy egyetlen vérmintából tízszer megmértük a Hb-szintet, és minden egyes vizsgálat esetében meghatároztuk a variációs együtthatót (CV). A CV a Coulter, a Cobas és a HemoCue módszerek esetében 0,68%, 0,82%, illetve 0,69% volt (1. táblázat).
Az egyes módszerek 259 Hb-meghatározására vonatkozóan először a központi tendencia (átlag és medián) és a szórás (tartomány és szórás) mérését értékeltük. Amint az a 2. táblázatban látható, nem találtunk statisztikai különbséget e paraméterek tekintetében. Megfigyeltük azonban, hogy a HemoCue módszer mutatta a legalacsonyabb átlagot (11,5 g/dl) és a legalacsonyabb mediánt (11,4 g/dl) mind a Coulter, mind a Cobas módszerhez képest (átlag = 11,6 és medián = 11,7, illetve 11,6 g/dl).
A következőkben a módszerpárok korrelációs együtthatóját vizsgáltuk a három módszer Hb-meghatározásának lineáris regressziós elemzéséből. A 3. táblázat mutatja az elemzés paramétereit, és azt jelzi, hogy minden párnak kiváló korrelációs együtthatója volt (0,97-0,99 közötti tartomány). Ez az eredmény némileg várható volt, mivel mindhárom módszert ugyanazon paraméter (Hb-szint g/dl-ben) mérésére tervezték. Ilyen körülmények között a két változó közötti egyezést nem megfelelően reprezentálja a kapcsolatuk erősségének mérése, vagy statisztikailag a lineáris regresszió korrelációs együtthatójának meghatározása.
Ezért úgy döntöttünk, hogy a Hb-meghatározás három módszerének egyezését a Bland és Altman által javasolt megközelítéssel értékeljük.7 Röviden, ez a megközelítés azt feltételezi, hogy ha két módszer egyezik, akkor minden páros meghatározás közötti különbség átlaga nem fog statisztikailag különbözni nullától. E megközelítés alkalmazásával az is lehetséges, hogy a két módszer között (egy adott konfidenciaintervallumon belül) megállapítsuk az egyezés határát, és grafikusan ábrázoljuk e különbségek szórását a Hb-szintek között. Ez például jelezheti, hogy a Hb-meghatározások egy adott tartományához nagyobb variabilitás társulhat-e, és így az adott Hb-tartományhoz kapcsolódó pontosság hiányára utalhat.
A Bland és Altman-féle megközelítésnek az adatainkra való alkalmazását a 4. táblázat mutatja. Látható, hogy az egyetlen olyan módszerpár, ahol a különbség átlaga nem különbözik nullától, a Coulter/Cobas páros (p = 0,588). Ezek tehát azok a módszerek, amelyek megegyeznek a Hb-mérésekben. Azok a módszerpárok, amelyekben a HemoCue módszer szerepelt, a különbség átlaga statisztikailag különbözött a nullától (p < 0,001).
A Bland és Altman megközelítés lehetővé tette, hogy bármely két módszer között kiszámítsuk az egyetértés határát. Ezek a határértékek a 4. táblázatban is szerepelnek. A Coulter/Cobas páros 1,13 g/dl egyetértési határt adott, míg a HemoCue módszerrel alkotott párok alacsonyabb egyetértési határokat mutatnak (Coulter/HemoCue = 0,78 g/dl és Cobas/HemoCue = 1,02 g/dl). Az egyezés határa tükrözi az adatok szórását a különbség átlaga körül (az 1. ábra szemlélteti).
1. ábra – A Hb-értékek közötti egyéni különbségeket (n=259) ábrázoltuk a Hb-mérési módszerpárok által meghatározott átlagos Hb-értékkel szemben. Az egyes ábrák a következő különbségek és átlagok ábráit mutatják: A, Coulter-Cobas; B, Coulter-HemoCue; és C, Cobas-HemoCue. A vonal a nulla különbséget jelzi.
Megbeszélés
Az adataink összességében azt mutatják, hogy a Coulter és a Cobas módszerek mutatják a legjobb egyezést, és hogy a HemoCue módszer a Coulter és a Cobas módszerrel összehasonlítva alacsonyabb Hb-meghatározást ad. Ez a különbség 0,10 és 0,13 g/dl a Coulter-, illetve a Cobas-módszerhez képest. Úgy tűnik azonban, hogy a HemoCue módszerrel végzett módszerpároknak szűkebbek az egyetértési határai, mint a Coulter és Cobas kombinációnak. Ez összhangban van a három módszer CV-jével. Így, bár a HemoCue módszer alacsonyabb Hb-szint mérést mutat, úgy tűnik, hogy ezek a mérések kevésbé ingadoznak a többi módszerrel összehasonlítva.
Ebben a vizsgálatban közvetlenül EDTA-K3-t tartalmazó Vacutainer csövekbe gyűjtött vénás punkcióból származó mintákat használtunk. Ezt a Hb mérés standardizálása érdekében tettük. A HemoCue rendszer és a Coulter STKS közötti 1%-os különbség (0,10 g/dl) egy része azzal magyarázható, hogy a HemoCue rendszer kompenzálja a vérminta zavarosságát. A Coulter és más, csak egy hullámhosszon fotometrikusan mérő műszerek tévesen megemelt értékeket adnak például a lipidek okozta zavarosság miatt.1,3 Az ICSH módszer2 0,003 abszorbanciaegységnyi zavarosságot fogad el, ami 0,11 g/dl hemoglobinnak felel meg. A magasabb zavarosság várható, mivel a véradók nem éheznek.
Az is lehetséges, hogy a Hb-méréshez használt biokémiai módszer (cianmetahemoglobin kontra hemoglobinazid) befolyásolhatta eredményünket. Meg kell említeni, hogy a cianmetahemoglobin az ICSH által ajánlott módszer.
A HemoCue rendszer előnyei a gyorsaság, egyszerűség és hordozhatóság tekintetében nemcsak vérbanki környezetben, hanem az orvosi rendelőkben is ajánlható szűrési módszerként.
2. ICSH. Recommendations for Reference Method for Hemoglobinometry in Human Blood (ICSH standard 1995) és a Nemzetközi Hemoglobincyamide Standard Specifications (4. kiadás). J Clin Pathol 1996;49:271-4.
3. Nicholls PD. A lipémiás minták hemoglobinértékének korrekciójára szolgáló HemoCue értékelése. Med Lab Sciences 1990;47:226-9.
4. Cable RG. Hemoglobin-meghatározás véradóknál. Transfusion Med Ver 1995;9:131-44.
5. Carlson DA, Daigneault RW, Statland BE. A HemoCue fotométer értékelése a véradók hemoglobinjának mérésére. Absztrakt az American Association of Blood Banks 40th anniversary meeting of the American Association of Blood Banks, Orlando, FL, 1987.
7. Bland JM, Altman DG. Statisztikai módszerek két klinikai mérési módszer közötti egyezés értékelésére. Lancet 1986;i:307-10.
Jacob Rosenblit – MD, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Cláudia Regina Abreu – BSC, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Leonel Nulman Szterling – MD, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
José Mauro Kutner – MD, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Nelson Hamerschlak – MD, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Paula Frutuoso – BSc, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Thelma Regina Silva Stracieri de Paiva – BSC, Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
Orlando da Costa Ferreira Júnior – MD, PhD. Hemoterápiás szolgálat, Hospital Israelita Albert Einstein.
A finanszírozás forrásai: Nem jelentették be
Érdekütközéses összeférhetetlenség: Nem jelentette be
Véglegesen megkapta: 1998. június 15
Elfogadva: 1998. július 23
Levelezési cím:
Jacob Rosenblit
Az Albert Einstein Kórház Hemoterápiás Szolgálata
Av. Albert Einstein, 627, 4th floor
São Paulo/SP, Brazília – CEP 05651-901
E-mail: [email protected]
RESUMO
CONTEXT: A hemoglobin (Hb) mérése a vérszegénység ellenőrzésének legszélesebb körben használt mutatója a véradók szűrése során. Jelenleg a legelterjedtebb fotometriai módszer a ciano-metaemoglobin. E technológia alternatívájaként a Hemocue kifejlesztett egy fotometriai módszert, amely az azid-metahemoglobin meghatározásán alapul. CÉLKITŰZÉS: Három módszer teljesítményének értékelése a hemoglobin (Hb) meghatározására véradókban. Vizsgálattípus: prospektív vizsgálat vérminták felhasználásával a Hb-adagolási tesztek összehasonlítására. HELYSZÍN: Az Israelita Albert Einstein Kórház Hemoterápiás Szolgálata, egy tercier magánintézmény. MINTÁK: 1996 márciusa és júniusa között 259 személytől vettek sorozatos vérmintákat. VIZSGÁLT VÁLTOZÓK: A vizsgálatok teljesítményét és összehasonlításukat korrelációs együttható-elemzéssel, lineáris regresszióval és az átlagok összehasonlításával végezték el. EREDMÉNYEK: A három módszer variációs együtthatója a következő volt: Coulter, 0,68%, Cobas, 0,82% és HemoCue, 0,69%. A három módszerrel végzett hemoglobin-meghatározások átlagai között nem volt statisztikailag szignifikáns különbség (p>0,05). A Coulter és a Cobas módszer jobb egyezést mutatott, míg a HemoCue módszerrel alacsonyabb hemoglobinszintet mértek. A Coulter/HemoCue és a Cobas/HemoCue párosok esetében azonban szűkebb volt az egyezés határa (+ 0,78 és + 1,02), mint a Coulter/Cobas páros esetében (+ 1,13). KÖVETKEZTETÉSEK: A három módszer kiváló egyezést mutatott a hemoglobin adagolására vonatkozóan.