Abstract
A vizsgálat célja annak meghatározása volt, hogy az ovulációban lévő idősebb nőknél a megrövidült tüszőfázis a fejlett (azaz korábbi) vagy a gyorsabb (azaz gyorsabb) follikulogenezis következménye. Normál ovulációval rendelkező, 40-45 éves (n = 15) és 20-25 éves (n = 13) nőkön naponta vénapunkciót és transzvaginális ultrahangvizsgálatot végeztek egy spontán menstruációs ciklus tüszőfázisában (kontrollciklus) és egy GnRH-agonistával végzett hipofízis-leállítás után (vizsgálati ciklus). A várakozásoknak megfelelően a kontrollciklusokban az idősebb alanyok a fiatalabbakhoz képest emelkedett d 3 FSH-t és lerövidült tüszőfázist mutattak. A hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengely szuppressziójából való felszabadulást követően a korai follikuláris fázis FSH-csúcsa korábban (6,8 vs. 9,8 d; P < 0,01) és nagyobb mértékben (12,1 vs. 6,5 mIU/ml; P < 0,01) jelentkezett az idősebb alanyokban. A szuppresszió felszabadulásától az azt követő LH-emelkedésig eltelt idő szintén rövidebb volt (17,5 vs. 20,8 d; P < 0,01) az idősebb csoportban. Az FSH-csúcstól az LH-emelkedésig eltelt idő azonban hasonló volt az idősebb és a fiatalabb csoportban (10,7 vs. 11,0 d; P = 0,74). A fiatalabb nőkhöz képest az idősebb alanyoknál az ösztradiol és az inhibin A follikuláris fázisban normális, az inhibin B szintje pedig alacsonyabb volt mind a kontroll-, mind a vizsgálati ciklusban. Arra a következtetésre jutottunk, hogy az idősebb ovulációs nőknél megfigyelt rövidebb tüszőfázis a korábbi domináns tüszőszelekciónak köszönhető, függetlenül a megelőző luteális fázis hormonális hatásaitól.
A reproduktív öregedés egy kontinuum, amely sok évvel az abszolút diszfunkció megjelenése előtt kezdődik. Az öregedési folyamat fontos megnyilvánulása a női termékenység progresszív csökkenése, amely a harmadik évtized második felében kezdődik, és 35 éves kor után exponenciális mértékűvé válik (1, 2). Ez a termékenységcsökkenés megelőzi a hipotalamusz-hipofízis-mellékburok (HPO) tengely diszfunkciójának olyan nyílt jeleit, mint a menstruációs rendszertelenség, és a nők többségének még jóval a 40-es éveikben is rendszeres, ovulációs menstruációs ciklusa van (3, 4). A menopauzát megelőző években a rendszeres ovuláció megmarad, miközben a menstruációs ciklusok fokozatosan rövidülnek (4-6). Ez a jelenség a tüszőfázis rövidülésének köszönhető, anélkül, hogy a luteális fázis hosszában változás következne be (5, 7). A reproduktív kor előrehaladásának további jellemzője az FSH emelkedése, amelyet nem kísér az LH emelkedése (monotróp FSH-emelkedés) (6-9). Úgy tűnik, hogy a monotróp FSH-emelkedés kezdete és a korábbi ovuláció időbeli összefüggésbe hozható a tüszőritkulás gyorsulásával, ami végül a tüszőtartalék kimerüléséhez vezet (10). Így az FSH monotróp emelkedése és a megrövidült tüszőfázis a reproduktív kor előrehaladásának és a gyorsan csökkenő termékenység klinikai indikátoraként szolgál (11).
A normális menstruációs ciklus során az FSH a késői luteális vagy a korai tüszőfázisban emelkedik, és jellemzően a korai tüszőfázisban éri el csúcspontját (12, 13). A domináns tüsző kiválasztódásával és az azt követő fejlődéssel az FSH viszonylag alacsony szintre csökken a ciklus közepén bekövetkező gonadotropinhullámig. Az előrehaladott reproduktív korú eumenorrheás nők domináns tüszője viszonylag egészséges, normális méretűre nő, normális vagy emelkedett ösztradiol (E2)-szintet termel, és normális progeszteronszintet választ ki a luteinizáció után (7, 8, 14). Az idősebb domináns tüsző e normális jellemzői arra utalnak, hogy az idősebb nőknél a korábbi ovuláció nem a tüsző valamely belső hibájára, hanem az extrafollikuláris hormonális miliőre vezethető vissza. A reproduktív öregedéssel kapcsolatos vizsgálatokban legkövetkezetesebben leírt endokrinológiai változások az FSH megnövekedett abszolút szintje (6-9), a korai follikuláris fázisban lévő FSH korábbi emelkedése (7) és az inhibin B korai follikuláris fázisban lévő szintjének csökkenése (15-18).
A jelenlegi vizsgálatot annak megállapítására végeztük, hogy az ovulációra hajlamos idősebb nőknél a megrövidült follikuláris fázis másodlagos-e a fejlett (azaz korábbi) vagy a felgyorsult (azaz gyorsabb) follikulogenezis miatt. Feltételeztük, hogy az idősebb nőknél a korábbi domináns tüszőfejlődés másodlagos a tüsző FSH korábbi emelkedéséhez képest, mint a fiatalabb kontrolloknál, és hogy a tüszőnövekedés abszolút sebessége hasonló lesz mindkét korosztályban. Más szóval azt feltételeztük, hogy az előrehaladott reproduktív korú nőkben a tüszőfejlődés inkább előrehaladott, mint felgyorsult. Az előző menstruációs ciklusból származó hormonális és intraovariális hatások potenciálisan megzavarhatják a domináns tüszők toborzásának és érésének vizsgálatát. Az előző ciklusból származó ilyen hatások kiküszöbölése érdekében minden alany HPO-tengelyét standard GnRH-agonista down-regulációval szupprimáltuk. A HPO-tengely szuppressziójának dokumentálása után összehasonlítottuk a hormonális, tüsző- és menstruációs funkciók helyreállását idősebb, ovulációs alanyoknál egy fiatalabb kontrollcsoporttal összehasonlítva.
Alanyok és módszerek
Kísérleti alanyok
A normál reproduktív öregedéssel kapcsolatos vizsgálatsorozat részeként 40-45 éves (n = 16) és 20-25 éves (n = 15) egészséges ovulációs nőket toboroztunk a részvételre. Minden alanynak rendszeres menstruációs ciklussal (21-35 d-es ciklusintervallummal), normális testtömegindexszel (18-24 kg/m2), orvosi vagy reproduktív rendellenességekkel (beleértve a meddőséget is), valamint 20 ng/ml alatti PRL-, 10 nmol/liter feletti progeszteron- és 3 nmol/liter alatti tesztoszteronszintekkel kellett rendelkeznie a vizsgálatot megelőző ciklusban. A vizsgálat időtartama alatt minden alany vagy szexuálisan absztinens volt, vagy nem hormonális fogamzásgátló módszert (pl. gátló módszert vagy méhen belüli fogamzásgátló eszközt) alkalmazott. Minden résztvevőtől írásbeli beleegyezést kaptak, és minden önkéntes számára pénzbeli kompenzációt biztosítottak. A protokollt a Washingtoni Egyetem emberi alanyokat vizsgáló bizottsága felülvizsgálta és jóváhagyta.
Anyagok és módszerek
Tanulmányi protokoll.
Kontrollciklusként minden alanyon napi vénapunkciót és sorozatos transzvaginális ultrahangvizsgálatot végeztek, hogy felmérjék a domináns tüszőfejlődést a spontán, természetes ciklus tüszőfázisában. A vizsgálati ciklusban a nafarelin-acetátot (400 μg, intranazálisan, naponta) 7 nappal azután kezdték el adni, hogy az előző ciklusban a vizelet LH-készletek kimutatták a ciklusközépi gonadotropin-emelkedést. Amikor a HPO-tengely szuppresszióját a szérum E2-szintje a vizsgálat kimutatási határa (73 pmol/liter) alatt volt, a nafarelint további 5 napig folytattuk a HPO-tengely egyenletes down-regulációjának biztosítása érdekében. A nafarelin abbahagyását követő naptól kezdve naponta vénapunkciót végeztek E2-analízis céljából. Amint a szérum E2-koncentráció elérte vagy meghaladta a 367 pmol/liter értéket, napi transzvaginális ultrahangvizsgálatokat végeztünk, amíg domináns tüszőösszeomlást nem észleltünk. A vizsgálati ciklust a kontrollciklust követő 6 hónapon belül kezdték el.
Vizsgálatok.
Az adott alany összes szérummintáját két példányban elemezték ugyanabban a vizsgálatban, hogy minimalizálják az intraassay variabilitás hatásait. A szérum FSH szintjét szilárd fázisú, kéthelyes monoklonális ELISA (DELFIA, Wallac Inc., Gaithersburg, MD) segítségével határoztuk meg. Az inter- és intraassay variációs koefficiens (CV) 4,6% és 2,3% volt. A szérum E2 RIA-t az ICN Biomedicals, Inc. által szállított reagensek felhasználásával végeztük. (Costa Mesa, Kalifornia, USA). Az inter- és intraassay CV 18%, illetve 9% volt. Az inhibin B mérésére szilárd fázisú szendvics ELISA-t (Serotec, Oxford, Egyesült Királyság) használtunk, amely az inhibin β alegységre specifikus monoklonális antitesttel bevont lemezek használatán alapul. Az inhibin B kimutatása egy második, az inhibin α-alegységre specifikus monoklonális antitest segítségével történik, a vizsgálati eljárás pedig a gyártó szerint a készletekben található reagensekkel (nátrium-dodecil-szulfát és peroxid) történő előkezelést jelenti. Az analitikai érzékenységet (pl. az inhibin βA-alegységére vonatkozó minimumot) a kimutatáshoz használt, az α-alegységre specifikus torma-peroxidázzal jelölt monoklonális antitesttel határozták meg. A gyártó által biztosított vizsgálati standardot a WHO első nemzetközi inhibin-standardjának (rekombináns humán inhibin; 91/624 tétel) felhasználásával kalibrálták, és az eredményeket e referenciaanyag milliliterére vonatkoztatott nemzetközi egységekben adják meg. A vizsgálatot két példányban ellenőriztük 2,00, illetve 9,56 NE/ml-t tartalmazó minták aliquotjainak felhasználásával. Ezen minőségellenőrzések alapján a vizsgálatok közötti CV 8,7%, illetve 3,3% volt az itt közölt adatokhoz használt 57 vizsgálat során.
Statisztikai elemzés.
Az egyes egyénektől származó egyetlen adatértéket tartalmazó eredmények (pl. a follikuláris fázis hossza) esetében a két kohorsz átlagait kétoldalas t-próbával hasonlították össze. A szignifikáns különbség jelzésére α = 0,05 értéket választottunk. Az egyes egyedek több adatértéket tartalmazó eredményei esetében (pl. sorozatos E2-szintek) a minta átlagait ismételt mérésekkel végzett ANOVA-val hasonlítottuk össze. A korábbi tanulmányok eredményei alapján azt vártuk, hogy az LH-emelkedés kezdetéig eltelt idő varianciája körülbelül 20%-os lesz. Ezért 20%-os variációs együtthatót feltételezve úgy becsültük, hogy minden csoportban 15 alany esetén 80%-os eséllyel találunk olyan kicsi különbséget, mint 20%.
Eredmények
Két fiatalabb és egy idősebb nő kiesett a vizsgálatból, mivel nem sikerült elérni a HPO tengely szuppresszióját. A fennmaradó alanyok kontrollciklusának kiindulási jellemzőit az 1. táblázat tartalmazza. A várakozásoknak megfelelően az idősebb alanyok a kontrollciklus d 3. ciklusában a fiatalabb alanyokhoz képest rövidült tüszőfázist, valamint emelkedett FSH-t és csökkent inhibin B-t mutattak. Mind a kontroll-, mind a vizsgálati ciklusokban minden korcsoportban minden alanynál kialakult egy domináns tüsző, amely a ciklus közepén bekövetkező LH-emelkedés után ultrahanggal bizonyíthatóan összeomlott, ami a természetes ciklusokban és a GnRH-szuppresszió abbahagyása után is láthatóan normális domináns tüszőfejlődést és ovulációt mutat. A Synarel (Searle, Skokie, IL) időtartama, amely a vizsgálati protokollban meghatározott szuppresszió eléréséhez szükséges volt, valamivel hosszabb volt a fiatalabb kontrolloknál (tartomány 9-20 d; átlag 12,8 ± 0,8 d; teljes dózis 5,1 ± 0,3 mg), mint az idősebbeknél (tartomány 9-13 d; átlag 11,8 ± 0,3 mg).0 ± 0,3 d; teljes dózis, 4,4 ± 0,1 mg; P = 0,05 mind az időtartamra, mind a dózisra vonatkozóan).
A kontrollciklus jellemzői idősebb alanyoknál és fiatalabb kontrolloknál
| . | Idősebb alanyok (n = 15) . | fiatalabb alanyok (n = 13) . | P (t-próbával) . |
|---|---|---|---|
| Kor (év) | 42,5 ± 0,4 | 23,2 ± 0,2 .4 | |
| Day 3 FSH (IU/liter) | 10.9 ± 1.4 | 5.7 ± 0.3 | <0.01 |
| 3. nap E2 (pmol/liter) | 171 ± 16 | 142 ± 16 | NS |
| 3. nap inhibin B (pg/ml) | 65,9 ± 13,2 | 117 ± 10,5 | 0.01 |
| Tüszőfázis hossza (nap) | 12,9 ± 0,5 | 14,8 ± 0,6 | 0,01 |
| Maximális átlagos tüszőátmérő (mm) | 21,2 ± 0,4 | 20.8 ± 0.5 | NS |
| Az LH csúcsértéktől a tüsző összeomlásáig eltelt idő (nap) | 1.2 ± 0.2 | 2.2 ± 0.1 | <0.01 |
| . | Idősebb alanyok (n = 15) . | fiatalabb alanyok (n = 13) . | P (t-próbával) . |
|---|---|---|---|
| Kor (év) | 42,5 ± 0,4 | 23,2 ± 0,2 .4 | |
| Day 3 FSH (IU/liter) | 10.9 ± 1.4 | 5.7 ± 0.3 | <0.01 |
| 3. nap E2 (pmol/liter) | 171 ± 16 | 142 ± 16 | NS |
| 3. nap inhibin B (pg/ml) | 65.9 ± 13,2 | 117 ± 10,5 | 0,01 |
| Follikuláris fázis hossza (nap) | 12,9 ± 0,5 | 14,8 ± 0,5.6 | 0.01 |
| Maximális átlagos tüszőátmérő (mm) | 21.2 ± 0.4 | 20.8 ± 0.5 | NS |
| Az LH csúcsértéktől a tüsző összeomlásáig eltelt idő (nap) | 1,2 ± 0,2 | 2,2 ± 0,1 | <0.01 |
Az értékek az átlag ± sem.
A kontrollciklus jellemzői idősebb alanyoknál és fiatalabb kontrolloknál
| . | Idősebb alanyok (n = 15) . | fiatalabb alanyok (n = 13) . | P (t-próbával) . |
|---|---|---|---|
| Kor (év) | 42,5 ± 0,4 | 23,2 ± 0,2 .4 | |
| Day 3 FSH (IU/liter) | 10.9 ± 1.4 | 5.7 ± 0.3 | <0.01 |
| 3. nap E2 (pmol/liter) | 171 ± 16 | 142 ± 16 | NS |
| 3. nap inhibin B (pg/ml) | 65,9 ± 13,2 | 117 ± 10,5 | 0.01 |
| Tüszőfázis hossza (nap) | 12,9 ± 0,5 | 14,8 ± 0,6 | 0,01 |
| Maximális átlagos tüszőátmérő (mm) | 21,2 ± 0,4 | 20.8 ± 0.5 | NS |
| Az LH csúcsértéktől a tüsző összeomlásáig eltelt idő (nap) | 1.2 ± 0.2 | 2.2 ± 0.1 | <0.01 |
| . | Idősebb alanyok (n = 15) . | fiatalabb alanyok (n = 13) . | P (t-próbával) . |
|---|---|---|---|
| Kor (év) | 42,5 ± 0,4 | 23,2 ± 0,4 | |
| Day 3 FSH (IU/liter) | 10,9 ± 1,4 | 5,7 ± 0,4.3 | <0.01 |
| 3. nap E2 (pmol/liter) | 171 ± 16 | 142 ± 16 | NS |
| 3. nap inhibin B (pg/ml) | 65.9 ± 13,2 | 117 ± 10,5 | 0,01 |
| Follikuláris fázis hossza (nap) | 12,9 ± 0,5 | 14.8 ± 0.6 | 0.01 |
| Maximális átlagos tüszőátmérő (mm) | 21.2 ± 0.4 | 20.8 ± 0.5 | NS |
| Az LH csúcsértéktől a tüsző összeomlásáig eltelt idő (nap) | 1,2 ± 0,2 | 2,2 ± 0,1 | <0,01 |
Az értékek az átlag ± sem.
Tüszőfázis hossza
A vizsgálat céljaira a tüszőfázist két intervallumra osztottuk: korai tüszőfázis (a menses kezdetétől vagy a GnRH-agonista szuppresszió abbahagyásától a korai tüszőfázis FSH-csúcsáig terjedő idő) és késői (a korai FSH-csúcs és a ciklusközi gonadotropinhullám közötti idő). A follikuláris fázis intervallumokat (teljes, korai és késői) az 1. ábra mutatja. A HPO-tengely szuppresszióból való felszabadulás után az idősebb kohorsz hamarabb érte el a korai follikuláris FSH-csúcsot (6,8 ± 0,7 vs. 9,8 ± 0,6 d; P < 0,01), így rövidebb korai follikuláris fázist eredményezett. Ezenkívül az idősebb kohorszban rövidebb idő telt el a szuppresszió felszabadulásától az azt követő LH-emelkedésig (17,5 ± 0,9 vs. 20,8 ± 0,7 d; P < 0,01), ami összességében rövidebb teljes tüszőfázist eredményezett. A korai follikuláris fázis FSH-csúcsától a ciklusközépi LH-emelkedésig (késői follikuláris fázis) eltelt idő azonban hasonló volt az idősebb és a fiatalabb csoportokban (10,7 ± 0,7 vs. 11,0 ± 0,8 d; P = 0,74). Mind az idősebb, mind a fiatalabb alanyoknál a nafarelin abbahagyásától a későbbi LH-felszökésig eltelt idő hosszabb volt, mint a kontrollciklus follikuláris fázisa (idősebbeknél 17,5 vs. 12,9 d; fiatalabbaknál 20,8 vs. 14,8 d).
Teljes, korai és késői follikuláris fázis hossza fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyoknál. A vizsgálati ciklus a HPO-tengely GnRH-agonistával történő szuppresszióját követő ciklust jelenti. A teljes tüszőfázis a menstruációtól (kontrollciklus) vagy a HPO-szuppresszió felszabadulásától (vizsgálati ciklus) az LH-emelkedésig tartó időszakot jelenti. A teljes tüszőfázist ezután egy korai és egy késői részre osztottuk. A korai tüszőfázis a menstruáció kezdetétől vagy a HPO-szuppresszió felszabadulásától a ciklusközi FSH-csúcsig terjedő időszak. A késői tüszőfázis a ciklusközi FSH-csúcs és a ciklusközépi LH-emelkedés közötti időszakot jelenti. A fiatalabb és idősebb nők közötti szignifikáns különbségeket egy kontroll- vagy vizsgálati cikluson belül a megfelelő sávok felett jelöljük.
Teljes, korai és késői follikuláris fázis hossza fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyoknál. A vizsgálati ciklus a HPO-tengely GnRH-agonistával történő szuppresszióját követő ciklust jelenti. A teljes tüszőfázis a menstruációtól (kontrollciklus) vagy a HPO-szuppresszió felszabadulásától (vizsgálati ciklus) az LH-emelkedésig tartó időszakot jelenti. A teljes tüszőfázist ezután egy korai és egy késői részre osztottuk. A korai tüszőfázis a menstruáció kezdetétől vagy a HPO-szuppresszió felszabadulásától a ciklusközi FSH-csúcsig terjedő időszak. A késői tüszőfázis a ciklusközi FSH-csúcs és a ciklusközépi LH-emelkedés közötti időszakot jelenti. A fiatalabb és idősebb nők közötti szignifikáns különbségeket a kontroll- vagy vizsgálati cikluson belül a megfelelő sávok felett tüntettük fel.
FSH
A korai follikuláris fázis FSH-csúcsát körülvevő FSH-profilokat mind a kontroll-, mind a vizsgálati ciklusok esetében a 2. ábra mutatja. A korai follikuláris fázis FSH-csúcsszintje mind a kontroll (12,0 ± 1,4 vs. 6,8 ± 0,3 mIU/ml; P < 0,01), mind a vizsgálati (12,1 ± 1,9 vs. 6,5 ± 0,4 mIU/ml; P < 0,01) ciklusban magasabb volt az idősebbeknél. Az FSH-csúcs nagyságában nem volt különbség a kontroll- és a tanulmányciklusok között az egyes korcsoportokon belül (2. ábra). Úgy tűnik tehát, hogy az FSH-csúcs nagysága mindkét korcsoportban független a megelőző luteális fázis hatásától.
FSH-értékek fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyoknál a ciklusközi FSH-csúcshoz viszonyítva mind a kontrollciklusokban, mind a HPO-tengely szuppresszióját követő ciklusokban (tanulmány). Ezek a minták nem különböztek szignifikánsan a kontroll és a vizsgálati ciklusok között.
FSH-értékek fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyoknál a ciklusközi FSH-csúcshoz viszonyítva mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját (vizsgálat) követő ciklusokban. Ezek a minták nem különböztek szignifikánsan a kontroll és a tanulmányciklusok között.
Petefészekhormon-szekréció
A domináns tüsző domináns szekréciós termékei az E2 és az inhibin A. A 3. ábra az E2 tüszőfázisú koncentrációit ábrázolja, az LH-csúcsra normalizálva, mindkét korcsoportban a kontroll és a tanulmányciklusokban. A domináns tüsző által szekretált E2 mintázata és mennyisége mindkét korcsoportban hasonló a vizsgálati és a kontroll ciklusok között. Bár az E2-emelkedés meredeksége és a domináns tüsző mérete nem különbözött a csoportok között, a ciklusközépi csúcs E2 nagyobb volt az idősebb nőknél mind a kontroll (1175 ± 73 vs. 973 ± 76 pmol/liter; P = 0,05), mind a vizsgálati ciklusokban (1351 ± 91 vs. 1061 ± 94 pmol/liter; P < 0,05). Mindkét ciklusban az idősebb alanyok is normális inhibin-A-koncentrációt mutattak a follikuláris fázisban, a kontroll- és a tanulmányciklusok között nem volt különbség (4. ábra). Az idősebb alanyoknál mind a kontroll (3,44 ± 0,45 vs. 2,50 ± 0,25 NE/ml; P = 0,08), mind a vizsgálati (3,32 ± 0,37 vs. 2,54 ± 0,26 NE/ml; P = 0,10) ciklusban magasabb volt az inhibin-A koncentrációja a ciklus közepén, de ez a növekedés nem érte el a statisztikai szignifikanciát. Tehát egy idősebb ovulációs nő domináns tüszője normális vagy emelkedett koncentrációban választja ki mind az E2-t, mind az inhibin A-t. E tüszőhormonok szekrécióját nem befolyásolja a HPO tengely korábbi szuppressziója.
E2 értékek fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyokban a ciklus közepi LH-emelkedéshez képest mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját követő ciklusokban (tanulmány). Ezek a minták nem különböztek szignifikánsan a kontroll és a vizsgálati ciklusok között.
E2 értékek fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 15) alanyoknál a ciklusközépi LH-emelkedéshez viszonyítva mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját (vizsgálat) követő ciklusokban. Ezek a minták nem különböztek szignifikánsan a kontroll és a vizsgálati ciklusok között.
Az inhibin A szérumkoncentrációja fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 12) alanyoknál a ciklusközépi LH-emelkedéshez viszonyítva mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját követő ciklusokban (vizsgálati ciklusok). Nem volt szignifikáns különbség a korcsoportok között.
Az inhibin A szérumkoncentrációja fiatalabb (n = 13) és idősebb (n = 12) alanyoknál a ciklusközépi LH-emelkedéshez viszonyítva mind a kontrollciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját követő ciklusokban (vizsgálati ciklusok). Az életkori csoportok között nem volt szignifikáns különbség.
Az inhibin A-val ellentétben az inhibin B, amelyet túlnyomórészt a kis (<10 mm) antralis tüszők termelnek (19, 20), az idősebb nőknél a korai tüszőfázisban szignifikánsan alacsonyabb volt mind a kontroll-, mind a tanulmányciklusokban (5. ábra). Megjegyzendő, hogy nem minden alany rendelkezett elegendő szérum aliquotával az inhibin A és/vagy B vizsgálatok elvégzéséhez; ezért az egyes ábrák legendájában az elemzett alanyok száma szerepel.
Az inhibin B szérumkoncentrációja fiatalabb (n = 8) és idősebb (n = 12) alanyoknál a ciklusközi FSH csúcshoz viszonyítva mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját követő ciklusokban (vizsgálati ciklusok). Az idősebb alanyoknál az inhibin B koncentrációja szignifikánsan alacsonyabb volt mind a kontroll-, mind a vizsgálati ciklusokban.
Az inhibin B szérumkoncentrációja fiatalabb (n = 8) és idősebb (n = 12) alanyoknál a ciklusközi FSH csúcshoz viszonyítva mind a kontrollciklusokban, mind a HPO tengely szuppresszióját követő ciklusokban (vizsgálati ciklusok). Az idősebb alanyoknál az inhibin B koncentrációja szignifikánsan alacsonyabb volt mind a kontroll-, mind a vizsgálati ciklusokban.
Diszkusszió
A korábbi vizsgálatok a tüszőfázis progresszív rövidülését mutatták ki az életkor előrehaladtával a látszólag normális domináns tüszőméret, szekréciós kapacitás és ovuláció ellenére (5, 7, 14). Ennek lehetséges magyarázata vagy a korábbi (előrehaladott) szelekció, vagy a domináns tüsző gyorsabb (felgyorsult) fejlődése. Mindkét esetben a tüszőfázis hosszát meghatározó tényezők közé tartozhatnak a luteális fázis fiziológiájának változásai (amelyek a parakrin és/vagy endokrin jelátviteli mechanizmusokat befolyásolják) vagy a korai tüszőfázis HPO kölcsönhatásainak változásai. A jelenlegi vizsgálat célja a megelőző luteális fázis hatásainak kiküszöbölése volt a HPO tengely hasonló mértékű szuppressziójával. Ily módon a follikuláris fázist hasonló kiindulópontból lehetett vizsgálni.
A normál nőkön végzett follikuláris fázis vizsgálatok kimutatták, hogy az FSH a késői luteális fázisban kezd emelkedni, a korai follikuláris fázisban éri el csúcspontját, majd a domináns tüsző kialakulásával csökken (21, 22). A domináns tüsző szonográfiás megjelenése a szérum E2 emelkedésével jár együtt, ami viszont az FSH-szint csökkenésével korrelál (23). Ezért a korai follikuláris fázis FSH-csúcsára összpontosítottunk, mint a domináns tüsző kiválasztásának indikátorára. Mind a kontroll ciklusokban, mind a HPO-tengely szuppresszióját követő ciklusokban az idősebb nőknél a tüszőfázis körülbelül 2-3 nappal rövidebb; konkrétan a korai tüszőfázis FSH-csúcsa hamarabb következik be. A jelenlegi vizsgálat eredményei azt sugallják, hogy az idősebb nőknél ez a rövidebb tüszőfázis az előrehaladott toborzásnak (azaz a domináns tüsző korábbi kiválasztásának) és nem a domináns tüsző gyorsabb (azaz gyorsabb) növekedésének köszönhető. Ha az idősebb nőknél a domináns tüsző növekedése felgyorsult volna, akkor azt vártuk volna, hogy különbséget találunk a csoportok között a korai tüsző FSH-csúcstól az LH-emelkedésig eltelt idő között.
Az idősebb nőknél tapasztalható rövidebb tüszőfázis feltételezett mechanizmusa az, hogy ezeknél az alanyoknál a fiatalabbakhoz képest korábban és nagyobb mértékben emelkedik az FSH. Ez a jelenség a megelőző luteális fázis hatásának hiányában következett be, ami arra utal, hogy a korai follikuláris FSH-emelkedés kezdete és nagysága a korai follikuláris fázis petefészekhormonjainak a csökkenő petefészek tartalékkal összefüggő finom különbségeire vezethető vissza. Másfelől azt is megfigyeltük, hogy a nafarelin-szuppressziót követően mindkét korcsoportban hosszabb volt a tüszőfázis a kontrollciklushoz képest. Bár ez az eredmény valószínűleg részben annak köszönhető, hogy az agyalapi mirigynek időre van szüksége ahhoz, hogy visszanyerje GnRH-rezisztenciáját (24), azt az elképzelést is alátámasztja, hogy a domináns tüszőrekrutáció az előző menstruációs ciklus luteális fázisában kezdődik (25).
A korai tüszőfázisú FSH-szekrécióban megfigyelt különbségekért valószínűleg az inhibin B, egy 32 kDa-os heterodimer glikoprotein, amelyet a petefészek tüszők választanak ki, és amely szelektíven gátolja az FSH-szekréciót. Az inhibin B szintje korrelál a fejlődő korai antralis tüszők kohorszméretével (26). Az inhibin B-szint csökkenése az idősebb ovulációs nőkben a progresszív follikuláris atresia és az antralis tüszők számának ezzel összefüggő csökkenése miatt következhet be (10, 27). Az FSH-emelkedéssel rendelkező idősebb nőknél alacsonyabb az inhibin B korai tüszőfázisban mért szintje, ami feltehetően a petefészek tüszők csökkenő számát tükrözi (19, 20, 28). Ez a hormonális mintázat az agyalapi mirigy leszabályozása után is fennmaradt, ami arra utal, hogy az idősebb nők alacsony inhibin B-szintje független a luteális fázis inhibin vagy szteroid szekréciójától.
A normális domináns tüsző mérete és az E2 és az inhibin A normális tüszőfázisú szekréciója azt jelzi, hogy az idősebb nőknél a domináns tüsző, ha egyszer már rekrutálódott, egészséges és reagál az FSH-stimulációra. Úgy tűnik azonban, hogy a domináns tüsző toborzásához és normális működésének fenntartásához magasabb FSH-szintre van szükség. Az idősebb ovulációval rendelkező nőknél jelentett magasabb ciklusközépi E2-szintek (14, 29) a domináns tüsző erőteljesebb szekréciójának és/vagy a másodlagos tüszők hozzájárulásának következménye lehet. A tüszőfolyadék szteroidtartalmával kapcsolatos korábbi vizsgálataink arra utalnak, hogy elsősorban a domináns tüsző felelős az idősebb premenopauzás nőknél megfigyelt magasabb keringő E2-szintekért (14). A jelenlegi vizsgálat eredményei alátámasztják a monotróp FSH-emelkedés és a domináns tüsző korai fejlődése és ovulációja közötti kapcsolatot. További vizsgálatok szükségesek annak megállapítására, hogy van-e összefüggés a megnövekedett FSH, a magasabb preovulatorikus E2-szint és/vagy a negyedik évtized vége felé megfigyelt gyorsabb tüszőérési arány között is.
Összefoglalva, ez a vizsgálat bizonyítékot szolgáltat arra, hogy az idősebb, ovulációra képes nőknél megfigyelt rövidült tüszőfázis a tüszőfázis korai szakaszának lerövidülésére vezethető vissza. A késői tüszőfázis hossza és hormonprofilja változatlan marad. Ez arra utal, hogy a domináns tüsző növekedése nem gyorsul fel, hanem a szelekciója előrehaladott. Ez a vizsgálat azt is bizonyítja, hogy az idősebb, peteéréses nők megrövidült tüszőfázisa nem függ a megelőző luteális fázis hormonális hatásaitól.
Megköszönjük Ms. Gretchen Davis és Ms. Laurie Guidrynek az alanyok toborzásában és a projektmenedzsmentben nyújtott segítségéért, Patrick Clarke úrnak az illusztrációkhoz nyújtott segítségéért, valamint Dorothy McGuinness asszonynak, Arlen Sarkissian úrnak, Joseph Moy úrnak és Sheila Mallette asszonynak a vizsgálatokhoz nyújtott szakértői technikai segítségéért.
Ezt a munkát a NIA RO1-AG-14579-es és a NICHHD U54-HD29164-es támogatása támogatta.
A rövidítések:
-
CV,
Variációs együttható(k);
-
E2,
ösztradiol;
-
HPO,
hipotalamusz-hipofízis-mellékburok.
,
,
:
–
van Noord
,
,
,
,
,
:
–
:
–
,
,
,
:
–
,
,
:
–
,
:
–
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
:
–
,
,
:
–
,
,
,
,
:
–
,
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
, Jr.
:
–
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
:
–
,
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
,
:
–
,
,
,
,
, Soules MR. A csökkent inhibin B szekréció összefügg a monotróp FSH emelkedéssel idősebb, ovulációs nőknél: a dimer inhibin A és B szérum és follikuláris folyadék szintjének vizsgálata spontán menstruációs ciklusokban.
:
–
,
,
,
,
,
, McNeilly AS. A dimer inhibin B mérése az emberi menstruációs ciklus során.
:
–
,
,
,
:
–
,
:
–
,
,
,
,
, Bouchard Ph.
:
–
van
,
,
,
,
:
–
,
:
–
:
–
,
,
,
,
:
–
,
,
,
,
,
:
–
,
,
,
:
–
,
,
,
:
–