Alai

研究デザイン

MWHSは人口ベースの前向き長期研究であり，その研究内容は，女性特有のホットフラッシュ（Hot Flashes）に対する予測因子についてである． この研究は，閉経後期または閉経前後の，一般的に健康な中年女性を対象とした画期的なものであった。 この研究対象基準により、研究チームは、特定の変数（例えば、人口統計学的因子、健康習慣、臨床因子）とほてりの発生、頻度、重症度、および持続時間との関連を前向きに検討することができたのです。 さらに、研究参加者が記入した詳細なアンケートにより、性機能、気分、病状（例：高血圧、アレルギー、糖尿病）など、更年期移行期によく報告される他の症状/問題についても調べることができた。

サンプル選択と募集

MWHSチームは、最初の募集期間に、女性が閉経後ではなく、生殖加齢という自然のプロセスを経験していることを保証するため、あらかじめ定められた適格性と除外基準を用いた。 特に、45歳から54歳の女性は一般的に更年期であり、ホットフラッシュが最も起こりやすい時期であるため、この年齢層の女性を対象とした。 また、子宮と卵巣が無傷であることを条件としました。したがって、自然に閉経を迎えた女性のみが対象となり、外科的閉経を迎えた女性は参加から除外されました。 最後に、過去12ヶ月間に少なくとも3回の月経があったと報告した女性を対象とし、一方、12ヶ月以上月経がなかった女性は臨床的に閉経後と見なされるため除外した。

追加の除外基準は、自然の閉経移行とホットフラッシュの自然発生を妨げる可能性がある既知の要因を避けるために使用した。 特に、現在妊娠中の女性は、この研究が生殖期から非生殖期への移行期にある女性に焦点を当てているため、除外されました。 また、ホルモン療法や経口避妊薬を使用している女性も除外しました。これは、この研究が女性のほてりの自然な発生に焦点を当てており、ホルモン療法や経口避妊薬はほてりの予防・軽減のために使用されることが多いからです。 最後に、癌の治療で使用される化学療法剤は卵巣卵胞を減少させ、ほてりのリスクを高める可能性があるため、癌の既往がある女性も除外しました。 図2

メリーランド州ボルチモア都市圏（米国）とその周辺郡に居住する45歳から54歳の女性の郵便物の宛先をAccuData America（Fort Myers, FL, USA）より購入しました。 その後、Johns Hopkins, Greenspring Stationにある臨床施設の最寄りの住所に募集の手紙を送り、そこから同心円状に目標登録者数に達するまで送付した。 報告の偏りを避けるため、この研究は一般的な「中年女性の健康調査」として発表された。 2141>

女性がクリニックに電話をかけると、クリニックのスタッフがその女性が適格基準を満たすかどうかを判断した。 女性の関心と適格性に基づいて、ベースラインのクリニック訪問が予定された。 このベースラインの診察で，女性は研究の一般的な目的を再度説明され，質問に答えられた。 2141>

ベースライン診療所訪問の際、各参加者は、詳細なベースライン研究アンケートに答え、ホルモン測定のために尿および血液サンプルを提供し、体重、身長、ウエストおよびヒップ周囲径、血圧を測定するよう依頼された。 さらに、卵巣容量と卵胞数を測定するために、経膣2次元超音波検査を行った。 一般に、ベースラインの診療は、参加者間のホルモンレベルの日内変動を最小限にするため、午前中（8:30〜10:00）に行われました。

その後、各参加者は、ベースラインの診察の後の3週間にそれぞれ週に1回、追加の血液および尿サンプルを提供するために診療所を訪れるように指示された。 4回目の来院時（ベースラインの来院から3週間後の最後の来院時）には、各女性はさらに短い質問票にも記入した。 2141>

診療所の訪問時に、職員が各質問票に記入漏れがないか確認し、参加者が定期的に服用している薬物があれば記録した。 ホットフラッシュの状態は、”Have you ever had hot flashes?” という質問に対する参加者の回答から割り出されました。 (はい」＝ホットフラッシュを経験したことがある、「いいえ」＝ホットフラッシュを経験したことがない）。

この4回の連続した週1回の診療は、女性が研究に参加する間、年単位で繰り返され、診療は上記のように1年目と同様に行われた。 これらの訪問の間、クリニックのスタッフは、女性の研究へのさらなる参加資格に影響を与える可能性のあるあらゆる変化を検討した。 具体的には、現在ホルモン療法を使用していると報告した女性、卵巣摘出や子宮摘出をしたことがある女性、癌と診断されたことがある女性の追跡調査は中止された。 一般に、女性は4年間の追跡調査の最後に閉経後となるため、合計4年間の追跡調査が行われました。 2141>

合計126,000通の募集状が郵送され、2507人の女性が詳しい情報を求めてクリニックに電話をかけ、適格性審査が行われた。 これらの女性のうち、合計780人の女性が採用され、MWHSの初年度に積極的な参加者となった。 780人のうち約5.5％が1年目で脱落し、その後の各年で約3％が脱落した。 脱落の理由としては、時間がなかった、健康上の問題があった、参加者が町から移動した、などがあった。 研究チームは、ホルモン療法の使用（n=30）、卵巣摘出および子宮摘出（n=25）、癌の診断（n=12）を報告した女性の追跡調査を中止した。 図3は、本研究に登録された女性のフローチャートである

女性が1回の訪問または1年間の訪問を休んでも研究に残るように求められ、それらのスキップした訪問からのデータは欠落とみなされました。 最後に、参加者のプライバシーを保護するために、各参加者は固有の識別コードを受け取りました。 すべての記録とデータは、指定されたオフィスの鍵付きファイルキャビネットに保管され、研究に直接関与する職員のみがファイルにアクセスすることができた。 初回訪問時、参加者は片面20ページ、約1時間かけてアンケートに回答した。 この詳細なアンケートには、人口統計学的情報、生殖歴と月経周期の特徴、ホルモン剤やその他のサプリメントの消費、更年期症状、病歴と家族歴、喫煙や飲酒などの健康行動に関する質問が含まれていた。

最後の1年間の訪問時には、参加者は約30分かかるアンケートの凝縮版（9ページ、片面）を記入した。 この調査では、2週間から4週間の期間（「同年」の訪問の間の時間）の間に変化したと思われる要因のみを評価しました。 例えば、この調査には病歴、ほてり歴、喫煙歴に関する質問が含まれていたが、生年月日や人種などの因子は凝縮された質問票からは除外されていた。

身体測定

各訪問日に、女性は靴なしで街着で較正済みの体重計で0.05 kg未満を切り捨てて体重測定された。 身長は標準的な身長計で靴を履かずに0.5 cm単位で測定された（切り捨て）。 体格指数（BMI）は，米国国立衛生研究所のオンラインBMI計算機で算出した． 正常，過体重，肥満の状態は，それぞれBMI 25kg/m2未満，25-29kg/m2，30kg/m2以上に分類される． ウエスト周径はウエストの最も細い部分で測定した。 2141>

卵巣容積と卵胞数の測定

ジョンズ・ホプキンス大学婦人科・産科の高度な訓練を受けた医師が、各研究参加者に対して経膣超音波検査を年に1回実施した。 すべての経膣超音波検査は，GE Logig 200 Alpha/Pro Modelの7.5 MHz経膣プローブを用いて行われた。 すべての測定は、女性の年齢、更年期の状態、ホットフラッシュの状態を知ることなく行われた。 卵巣の検査は、外縁から内縁への走査によって確立された。 各卵巣において、2〜10mmの大きさのすべての卵胞を測定し、数えた。 卵胞の大きさは、2〜3個の垂直方向の測定値から算出した。 各卵胞と卵巣の体積は、楕円体の公式（LxWxDxpi/6）を適用して計算した。

採血とホルモン値の測定

血液は訓練を受けた瀉血師が行った静脈穿刺によって採取された。 全血サンプルのアリコートは、将来の遺伝子解析のために-20℃で保存されるか、または血清抽出のためにさらに処理された。 血清抽出のため、サンプルは冷却した遠心分離機で2000 g、20分間遠心分離された。 遠心分離後、血清は吸引され、ホルモン分析まで-70℃で保存された。

参加者は更年期移行期であったため、研究期間中は周期が不規則であった。 測定間の変動を最小限に抑えるため、サンプルは絶食状態の女性から、同じ時間帯に採取されたが、周期の同じ日には採取されなかった。 さらに、研究の各年ごとに4つの異なる血液サンプル（1ヶ月のうち1週間ごとに1つ）が採取されました。 エストラジオール、テストステロン、プロゲステロン、性ホルモン結合グロブリン（SHBG）の血清濃度は、酵素結合免疫吸着法（ELISA；DRG、NJ USA）によって測定された。 すべてのアッセイは、同じ研究室（Dr. Flaws, University of Illinois, Urbana, IL, USA）により、参加者の特徴を知ることなく行われた。 各サンプルは、同じアッセイ内で二重に定量された。 一部のサンプルは、アッセイ値が時間の経過とともに劇的に変化しないことを確認するために、複数のアッセイで実行された。 全体として、平均的なアッセイ間変動は5%未満であった。 すべての統計解析において、参加者ごとの平均値が使用された。 2141>

閉経状態の判定

閉経状態は、調査票の月経周期歴に関するいくつかの質問に対する女性の回答に基づいて判定された（例：月経周期歴に関する質問）。 初潮の年齢、月経周期の規則性、過去1年間の月経周期数など）。 具体的には、閉経前の女性とは、過去3ヶ月以内に最終月経を経験し、過去1年間に11回以上の月経があったと報告した人である。 更年期女性は、最終月経が過去1年以内にあり、過去3ヶ月以内にない人、または最終月経が過去3ヶ月以内にあり、過去1年以内の月経回数が全体で10回以下である人とした。 閉経後の女性は、過去1年以内に月経がなかった人としました。 研究期間中、閉経後になった女性（n = 120）の追跡調査は中止された。

ホットフラッシュ変数

研究の質問票の一連の質問を通じて、ホットフラッシュの詳しい履歴が入手された。 これらの質問は、MWHSチームによって12年以上にわたって実施された過去の研究において、ほてりに関するデータを収集するために使用されてきたものです。 女性は、ほてりを感じたことがあるかどうか、過去30日以内にほてりを感じたかどうか、過去30日以内に感じたほてりの回数、ほてりが初めて生じた年齢、ほてりの重症度と頻度、ほてりを感じていた期間について尋ねられた。

ほてりの重症度は、女性が、通常の活動を妨げるほどの汗を伴う熱感として描写されたほてりを感じた場合に中程度または重症と分類された。 発汗や通常の活動を妨げることなく、温かい感覚と表現されるほてりがあった場合、女性は軽度のほてりとして分類された。 ほてりの頻度は、ほてりの発生に関する詳細な質問に基づいて決定された。 具体的には、1時間ごと、2-5時間ごと、6-11時間ごと、12-23時間ごと、週1-2日、週5-6日、月2-3日、月1日、月1日未満、または全く経験しないかを尋ねた。

ピーク重症までの時間は、ほてりが最もひどくなる年齢とほてりを初めて経験した年齢の差として算出された。 デフォルトでは、ベースラインの訪問時にホットフラッシュが最もひどいと報告された年齢がピーク重症度とされた。 調査期間中に、女性がベースライン時の調査よりも高い重症度を報告した場合、後の調査の時点が参加者のピーク時の重症度とみなされた

さらに、女性は他の女性親族（例えば、母親、姉妹、叔母）にほてりがあるかどうかを尋ねられた。 最後に、睡眠の質と夜間に経験するほてり（すなわち、寝汗）についていくつかの質問で照会した。 具体的には、女性は寝汗の発生、夜間の回数（頻度）、重症度（夜間に服やシーツを取り替える必要性、典型的な1週間の頻度）について質問された。

性的活動

性的活動は、性的に活発か、活発の場合の満足度、活発ではない理由（パートナー関連または個人の理由）を尋ねるいくつかの質問により決定された。 また、性行為の頻度、性行為の楽しみ、性行為中の興奮、性行為中のオーガズム、パートナーへの情熱、パートナーへの満足、性行為中の痛み、性行為中の潤滑、性的ファンタジーなどの短編個人経験質問票の項目に基づいて成果のサブセットを作成した。 2141>

生活習慣

我々の予備的横断研究を含む先行研究では、タバコの喫煙はほてりのリスク上昇と関連していることが示された。 MWHSでは、タバコの喫煙状況は質問項目を用いて評価された。 MWHSでは、「タバコを吸ったことがありますか」「今も吸っていますか」という質問で喫煙状況を評価しました。 喫煙状況は、「現在」「以前」「一度もない」に分類されました。 喫煙者については、喫煙の頻度、量、種類に関する情報も収集された。

同様に、アルコール消費に関するデータも以下の質問で収集された。 “生涯で、あらゆる種類のアルコール飲料を少なくとも12杯飲んだことがありますか？”、”過去12ヶ月で、あらゆる種類のアルコール飲料を少なくとも12杯飲んだことがありますか？”。

身体的活動は、仕事と余暇での活動レベルに関する質問に対する参加者の回答によって評価された。 仕事では、座る／立つ／歩く／重いものを持ち上げる／疲れる／汗をかく」、「同年代の人と比べて、仕事は体力があると思う」、「同年代の人と比べて、余暇は体力があると思う」、「余暇には、スポーツをする／テレビを見る／歩く／サイクリング」などの質問が含まれた。

気分・感情の状態

抑うつ症状の経験は、Centers for Epidemiologic Studies – Depression Scale (CES-D) を用いて評価された。 調査票には複数の質問が含まれ、女性は診療所での診察中と過去1週間の自分自身について説明するよう求められた。 これらの質問には、女性が感じたことを最もよく表す文が含まれていた（例：「幸せだった」、「自分の人生は失敗だったと思った」、「泣くことがあった」、「自分のしていることに心を留めておくことが難しかった」）。 2141>

その他の健康関連アウトカム

女性は一連の質問を用いて病歴について質問された。 最初の質問は、選択された病気/医学的状態のリストを提供し、参加者は「はい/いいえ」に印をつけ、最初に診断された年齢を示すよう求められた。 このリストには、子宮筋腫、糖尿病、てんかん、喘息などの病気や病状が含まれています。 また、失禁、膣分泌物、頭痛など、この年代の女性が経験する可能性のある他の症状についても質問しました。 そして、それぞれの症状が過去1年間にどれくらいの頻度で発生したかをマークしてもらいました。 最後に、スタッフが参加者に薬の使用について質問し、その情報は別途記録されました

アンケートには、ホルモン補充療法とハーブサプリメントに関する質問も含まれていました。 これにより、参加者がホルモン剤や漢方薬を服用していないことを確認することができた。

一般情報

雇用形態は、雇用（常勤またはパートタイム）と非雇用に分類された。 2141>

フタル酸エステル代謝物レベル

フタル酸エステルは、パーソナルケア製品に含まれ、内分泌かく乱化学物質とみなされている。 女性はこれらのフタル酸エステル含有製品を使用する可能性が高いため、195人の参加者のサンプルのサブセット（ほてり96人、ほてりなし99人）で、尿中のフタル酸エステル代謝物レベルを評価しました。 交絡の可能性を最小限にするため、このサブセットのサンプルは、非喫煙者とBMIが同程度の白人女性のみを含んでいた。 尿サンプルは、ワシントン大学公衆衛生学部環境衛生研究所&微量有機物分析センターで、同位体希釈高速液体クロマトグラフィー負イオンエレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析法（HPLC-MS/MS）により分析されました。 詳細な方法はZiv-Galらにより記載されています。

統計解析

MHWSの出版物において、データは様々な統計的アプローチを用いて解析されています。 そのアプローチには，一変量および二変量解析，ロジスティック回帰および一般化推定方程式モデル，生存分析，ベイズネットワーク分析が含まれるが，これらに限定されるものではない。 各解析において、潜在的な影響修飾因子や交絡因子は、発表された論文に詳細に記載されているように検討された

。