Effect van Digibind™ en DigiFab™ op de meting van serum Digoxine
Digibind en DigiFab zijn Fab-fragmenten van antidigoxine-antilichaam die worden gebruikt bij de behandeling van een levensbedreigende acute digoxine-overdosis. Digibind, het eerste beschikbare antidotum voor de behandeling van digoxine-overdosering, is sinds 1986 verkrijgbaar in de Verenigde Staten (Glaxo Wellcome Inc.), en meer recentelijk, in 2001, heeft de Food and Drug Administration van de Verenigde Staten (FDA) DigiFab goedgekeurd voor de behandeling van digoxine-overdosering. Digibind wordt geproduceerd door schapen te immuniseren met digoxine-menselijk albumineconjugaat, gevolgd door isolatie van digoxinespecifiek antilichaam uit het bloed en papainedigestie om het Fab-fragment van het antilichaam te genereren. Het Fab-fragment van het antidigoxine-antilichaam wordt vervolgens verder gezuiverd. DigiFab wordt bereid door injectie van schapen met digoxine-dicarboxymethylamine, een digoxine-analoog, gevolgd door isolatie van antidigoxine-antilichaam uit het bloed, papaïne digestie, en vervolgens zuivering van het Fab-fragment met behulp van affiniteits-chromatografie. Het molecuulgewicht van DigiFab (46 000 Da) is vergelijkbaar met het molecuulgewicht van Digibind (46 200 Da). Gewoonlijk bedraagt de dosis Digibind 80 maal de lichaamsbelasting met digoxine; als noch de ingenomen dosis noch de plasma digoxineconcentratie bekend is, wordt gewoonlijk 380 mg Digibind bij de patiënt geïnjecteerd. De halfwaardetijd van het Fab-fragment bij de mens bedraagt 12-20 uur, maar deze kan bij patiënten met nierinsufficiëntie worden verlengd. Digibind en DigiFab zijn gelijkwaardig in hun digoxine-bindend vermogen. Bovendien zijn beide verbindingen in staat endogeen DLIS te binden.
Naast digoxine blijkt Digibind in staat cardenolide te neutraliseren dat op positie 3 is geglycosyleerd (digitoxine en ouabain) met een vergelijkbare potentie, ongeacht substituties in het steroïde deel van het molecuul. Daarom is Digibind doeltreffend bij de behandeling van plantenvergiftiging met vingerhoedskruid, dat verschillende hartglycosiden bevat. Rich et al. toonden een succesvolle behandeling aan van een 22-jarige man met Digibind die opzettelijk een overdosis had genomen met een zelfgemaakt vingerhoedskruid extract. Bovendien is Digibind in staat om zowel hartglycosiden als de bijbehorende aglycons te neutraliseren – bijvoorbeeld oleandrine, het actieve bestanddeel van oleander extract – en is het effectief bij de behandeling van levensbedreigende oleander toxiciteit . Bovendien kan Digibind doeltreffend zijn bij de behandeling van een overdosis Chan Su – Chan Su is een Chinees geneesmiddel dat bufalin en andere cardioactieve steroïden van de bufadienolideklasse bevat – maar de doeltreffendheid van Digibind bij de behandeling van een Chan Su-vergiftiging is gering in vergelijking met de doeltreffendheid bij de behandeling van een overdosis digoxine. Dit is te wijten aan de geringe specificiteit van Digibind voor het neutraliseren van cinobufagin en cinobufatolin, die ook bestanddelen van Chan Su zijn, evenals paddengif.
Zowel Digibind als DigiFab interfereren met de meting van serum digoxine met behulp van immunoassays. De mate van interferentie is afhankelijk van de testopzet en de specificiteit van het antidigoxine-antilichaam. Zowel de micropartikel enzyme immunoassay van digoxine (MEIA op de AxSYM analyzer, Abbott Laboratories, Abbott Park, IL) als de Stratus digoxine assay toonden digoxinewaarden aan die hoger waren dan de gemeten vrije digoxineconcentratie in aanwezigheid van Digibind . McMillin et al. onderzochten het effect van Digibind en DigiFab op 13 verschillende digoxine-immunoassays. Positieve interferentie in de aanwezigheid en afwezigheid van digoxine werd waargenomen met Digibind en DigiFab, hoewel de omvang van de interferentie iets minder was met DigiFab. De omvang van de interferentie varieerde aanzienlijk met elke methode, waarbij de IMMULITE®, Vitros®, Dimension® en Access® digoxinemethoden de grootste interferentie vertoonden. Minimale interferenties werden waargenomen bij de FPIA-, MEIA-, SYNCHRON- en CEDIA-methoden. De auteurs merkten ook op dat het monitoren van vrije digoxine (in het eiwitvrije ultrafiltraat) deze interferentie elimineert, omdat zowel Digibind als DigiFab, als gevolg van hun geschatte molecuulgewicht van 46 000 Da, afwezig zijn in eiwitvrij ultrafiltraat . Digibind en DigiFab interfereren niet met de meting van serum digoxine met behulp van een chromatografische methode, zoals vloeistofchromatografie gecombineerd met massaspectrometrie. Kanno et al. beschreven een methode voor de gelijktijdige analyse van digoxine, digitoxine en verwante verbindingen met behulp van vloeistofchromatografie in combinatie met tandemmassaspectrometrie . Oiestad et al. beschreven ook een vloeistofchromatografie-tandem massaspectrometriemethode (LC-MS/MS) voor digoxine en digitoxine in volbloed voor autopsiegevallen. De monsters werden bereid door vloeistof-vloeistofextractie met ethylacetaat/heptaan/dichloormethaan (3 : 1 : 1 in volume), en de chromatografische scheidingen werden verricht met een C-18 omgekeerde-fasekolom. Massadetectie werd uitgevoerd door positieve ionen mode electrospray op ammoniumadducten, en gedutereerde digoxine (digoxine-d3) werd gebruikt als interne standaard. Chromatografische methoden worden echter zelden gebruikt in klinische laboratoria, hoewel forensische toxicologielaboratoria en misdaadlaboratoria die betrokken zijn bij sterfgevallenonderzoek met dergelijke analyseapparatuur zijn uitgerust.