Utrzymywanie i hodowla bakterii
Najczęstsze barwniki
Barwnik prosty
Barwnik siatkowy
Ponieważ bakterie są małe, przezroczyste i bezbarwne, często nie można ich zobaczyć pod mikroskopem bez jakiegoś barwnika. Plama jest doskonałym sposobem na zabarwienie bakterii, aby łatwiej było je zobaczyć, jak również na ich identyfikację i organizację. Istnieją 2 główne rodzaje plam, które można zrobić z bakteriami – prosta plama i plama Grama.
W prostej plamie, chcesz zamontować bakterie na slajdzie przy użyciu odpowiednich technik rozmazu. To zapewni, że masz cienką warstwę i tylko niewielką ilość, w przeciwnym razie będzie to bardzo trudne do znalezienia pod mikroskopem. Następnie należy zabarwić bakterie na kolor. Powszechne barwniki obejmują błękit metylenowy, fiolet krystaliczny i fuksynę podstawową. Plamy mają specjalne komórki zwane chromoforami, które są jonami niosącymi kolor i mają tendencję do bycia lekko dodatnimi. Bakterie mają tendencję do bycia lekko ujemne, więc dwa przyciągają się, co pozwala plama trzymać się bakterii. Barwnik ten jest używany głównie do lepszego oglądania organizmów.
W przeciwieństwie do tego, można również użyć plamy Grama. Christian Gram stworzył plamę Grama w 1884 roku, i od tego czasu jest ona używana. Plama Grama umieszcza organizmy w dwóch kategoriach – Gram dodatnie, lub Gram ujemne. Organizmy Gram dodatnie zabarwiają się na kolor fioletowy lub niebieski, natomiast Gram ujemne na kolor różowy lub czerwony. Do barwienia organizmów używa się fioletu krystalicznego, a na podstawie koloru, jaki przybierają, można znaleźć podstawowe cechy charakterystyczne dla danego organizmu. Główna różnica pomiędzy tymi dwoma grupami opiera się na tym, z czego składają się ich ściany komórkowe. Bakterie Gram dodatnie mają ścianę komórkową zbudowaną z peptydoglikanu, podczas gdy bakterie Gram ujemne mają ścianę komórkową zbudowaną z polisacharydów i lipidów. Chociaż to zabarwienie jest dobrym wstępnym krokiem w organizowaniu i umieszczaniu bakterii w grupach, nie zawsze się sprawdza. Istnieje kilka bakterii, które mogą barwić się zarówno negatywnie jak i pozytywnie, a inne nie barwią się w ogóle.
Jak widać na tych zdjęciach, bakterie Gram ujemne zabarwiają się na czerwono, (po prawej), a bakterie Gram dodatnie na niebiesko lub fioletowo, (po lewej.)
.