Alai

Ciekawi Cię chemiluminescencyjny test ELISA, ale nie jesteś dokładnie pewien czym jest i jak go używać? Nasz film Porównanie testów kolorymetrycznych i chemiluminescencyjnych ELISA omawia podobieństwa między tymi dwoma typami testów oraz w jaki sposób mogą one usprawnić Twoje testy laboratoryjne.

Obejrzyj nasz film, aby:

• Dowiedzieć się, jak testy chemiluminescencji i kolorymetryczne ELISA mierzą biomarkery
• Poznać różne typy czytników płytek używanych do przeprowadzania każdego z testów
• Porównać składniki każdego z testów

Porównanie testów kolorymetrycznych i chemiluminescencji ELISA

Spis treści filmu

Witam, Jestem Christi Caillouette z firmy ALPCO! Dzisiaj przeprowadzę Państwa przez porównanie kolorymetrycznych i chemiluminescencyjnych testów immunoenzymatycznych, zwanych również testami ELISA.

Zasada działania testów Sandwich ELISAs

Choć istnieje wiele rodzajów testów, testy ELISA, do których będę się dzisiaj odnosić, są testami typu sandwich. Testy Sandwich ELISA mają przeciwciało powlekane na płytce, które wiąże się konkretnie z pożądanym analitem. Po etapie płukania dodaje się przeciwciało wykrywające i etykietę enzymu, które wiążą się z analitem. Dodawany jest substrat w celu wygenerowania reakcji w studzienkach. W zależności od rodzaju testu, wytwarzany jest kolor lub światło. Reakcja ta może być mierzona za pomocą czytnika płytek. Stopień zmiany koloru lub emitowanego światła wskazuje ilość analitu w próbce.

Pomiar nieznanych stężeń biomarkerów

Oba testy kolorymetryczne i chemiluminescencyjne wykorzystują znane standardy do generowania krzywej standardowej w celu pomiaru nieznanego stężenia analitu w próbkach. W zależności od zestawu, jest to osiągane za pomocą programów komputerowych z 4 lub 5 parametrowymi algorytmami dopasowania krzywej logistycznej. Oba typy zestawów zapewniają użytkownikowi pomiary analitu w bardzo podobny sposób.

Wydajność kolorymetrycznych testów ELISA

Kolorymetryczne testy ELISA wymagają standardowego czytnika mikropłytek do wykrywania reakcji zmiany koloru między etykietą enzymu a substratem. Czytnik wysyła długość fali, zazwyczaj 450 nm, przez każdą studzienkę w celu określenia gęstości optycznej lub odczytu „OD” próbek. W zależności od czytnika płytek, odczyty OD zawierają się w przedziale od 0 do 4 z dokładnością do tysięcznego miejsca po przecinku. Odczyty OD są ograniczone przez pojemność spektrofotometru.

Wydajność Chemiluminescencji ELISAs

Chemiluminescencja ELISAs wymaga czytnika mikropłytek zdolnego do pomiaru luminescencji w celu wykrycia reakcji świetlnej pomiędzy etykietą enzymu a substratem. Światło wydzielane przez reakcję w studzienkach jest przekazywane przez światłowód do fotopowielacza w czytniku, który wysyła względne jednostki światła lub „RLU”. W zależności od czytnika płytek, RLU mogą wynosić od setek do milionów. Ta rozpiętość jednostek zapewnia użytkownikom lepszą czułość analityczną i szerszy zakres dynamiczny poprzez większą separację pomiędzy punktami i redukuje ograniczenia odczytów gęstości optycznej ze standardowego czytnika mikropłytek.

Kolorymetryczne vs. Chemiluminescencyjne testy ELISA

Teraz pokażę Państwu, co generalnie znajduje się w naszych zestawach kolorymetrycznych i chemiluminescencyjnych ELISA i jak te zestawy różnią się tylko nieznacznie. Pokażę Państwu kolorymetryczny test ELISA Insuliny Ludzkiej firmy ALPCO i nasz test ELISA Chemi Active GLP-1 (7-36) amidu firmy STELLUX.

Komponenty kolorymetrycznego testu ELISA Insuliny Ludzkiej

Po pierwsze, zaczniemy od kolorymetrycznego testu ELISA Insuliny Ludzkiej firmy ALPCO. W tym teście kolorymetrycznym otrzymasz:

• 96-dołkową mikropłytkę – płytka jest przezroczysta, aby umożliwić pomiar OD koloru na płytce
• Standard zerowy
• Standardy, od A do E – każda fiolka zawiera znane wartości insuliny w celu ustalenia krzywej standardowej
• Kontrole – zawierające znane wartości insuliny do kontroli jakości.
• Przeciwciało detekcyjne znakowane enzymem
• Koncentrat buforu płuczącego
• Substrat TMB – który podczas inkubacji zmienia kolor studzienek na niebieski.
• Roztwór zatrzymujący – który jest dodawany w celu zatrzymania reakcji zmiany koloru w dołkach, zmieniając kolor dołków na żółty.
• I uszczelniacze do płytek

STELLUX® Chemiluminescence Active GLP-1 (7-36) amide ELISA Components

Następnie, mamy STELLUX® Chemi Active GLP-1 (7-36) amide ELISA firmy ALPCO. W tym teście chemiluminescencyjnym, otrzymasz:

• Aktywny GLP-1 96-dołkowa mikropłytka – Zauważ, że płytka Chemi jest czarna zamiast przezroczystej. Czarna płytka zmniejsza zakłócenia światła tła podczas odczytu płytki.
• Standardy
• Poziomy kontrolne
• Bufor do oznaczeń
• Przeciwciało detektora
• Bufor do oznaczeń
• Bufor do oznaczeń
• Stężony bufor do płukania
• Streptawidyna-HRP – która działa jako etykieta enzymu.
• Bufor streptawidyny-HRP – który jest używany do rozcieńczenia streptawidyny-hrp do siły roboczej.
• Substrat chemiluminescencyjny A
• Substrat chemiluminescencyjny B – które są łączone w celu uzyskania mocy roboczej substratu chemiluminescencyjnego, który oddziałuje z etykietą enzymu w celu wygenerowania reakcji chemiluminescencyjnej w każdej studzience.
• Uszczelniacze płytek

Wniosek

Jak widać, niektóre odczynniki różnią się między kolorymetrycznymi i chemiluminescencyjnymi testami ELISA, ale zasada każdego z tych testów jest podobna i oba pozwalają na pomiar stężenia nieznanych analitów w próbkach. Niezależnie od tego, czy używasz zestawów kolorymetrycznych, czy jesteś zainteresowany wypróbowaniem naszych testów chemiluminescencyjnych, mamy coś dla Ciebie. ALPCO jest tutaj, aby pomóc Ci odkryć możliwości dla Twojego laboratorium. Aby zapoznać się z naszą pełną ofertą testów ELISA, prosimy odwiedzić naszą stronę internetową. Mamy wiele wspaniałych zasobów, które pomogą Państwu w realizacji projektów, więc proszę się rozejrzeć.

Dziękujemy za oglądanie!

Aby dowiedzieć się więcej o produktach ALPCO, prosimy o kontakt z Robertem Somogyi pod adresem [email protected].