Alai

Study design

The Midlife Women’s Health Study (MWHS) was a prospective longitudinal population-based study. Jego innowacyjność polegała na włączeniu do niego ogólnie zdrowych kobiet w średnim wieku, które były albo w późnej premenopauzie, albo w okresie okołomenopauzalnym. Kryteria włączenia pozwoliły zespołowi badawczemu na prospektywne zbadanie związków między określonymi zmiennymi (np. czynnikami demograficznymi, nawykami zdrowotnymi i klinicznymi) a występowaniem, częstością, nasileniem i czasem trwania uderzeń gorąca w czasie. Dodatkowo, szczegółowe kwestionariusze wypełniane przez uczestników badania pozwoliły na zbadanie innych powszechnie zgłaszanych objawów/problemów podczas przejścia menopauzalnego, w tym funkcji seksualnych, nastroju i stanów chorobowych (np. nadciśnienie, alergie, cukrzyca).

Dobór próby i rekrutacja

Zespół MWHS zastosował wcześniej ustalone kryteria kwalifikacji i wykluczenia, aby zapewnić, że w początkowym okresie rekrutacji kobiety nie były w okresie pomenopauzalnym i przechodziły naturalny proces starzenia się reprodukcyjnego. W szczególności, kobiety w wieku od 45 do 54 lat zostały włączone do badania, ponieważ kobiety te są zazwyczaj w okresie okołomenopauzalnym i jest to czas, kiedy kobiety są najbardziej narażone na uderzenia gorąca. Kryteria kwalifikacji obejmowały również posiadanie nienaruszonej macicy i obu jajników; dlatego też, tylko te kobiety, które naturalnie przechodziły okres menopauzalny kwalifikowały się do badania, podczas gdy kobiety, które przeszły menopauzę chirurgiczną zostały wykluczone z udziału w badaniu. Wreszcie, kobiety, które zgłosiły wystąpienie co najmniej 3 miesiączek w ciągu ostatnich 12 miesięcy zostały włączone do badania, natomiast kobiety, które nie miały miesiączki przez ≥12 miesięcy zostały wykluczone, ponieważ klinicznie są uważane za pomenopauzalne

Dodatkowe kryteria wykluczenia zostały zastosowane w celu uniknięcia znanych czynników, które mogą zakłócać naturalne przejście menopauzalne i naturalne występowanie uderzeń gorąca. W szczególności wykluczono kobiety w ciąży, ponieważ badanie koncentrowało się na kobietach, które przechodziły z etapu reprodukcyjnego do niereprodukcyjnego w swoim życiu. Dodatkowo wykluczono kobiety stosujące obecnie terapie hormonalne lub doustne środki antykoncepcyjne, ponieważ badanie koncentrowało się na naturalnych doświadczeniach kobiet związanych z uderzeniami gorąca, a terapie hormonalne i doustne środki antykoncepcyjne są często stosowane w celu zapobiegania/redukcji uderzeń gorąca. Wreszcie, wykluczono kobiety z jakąkolwiek historią choroby nowotworowej, ponieważ chemioterapeutyki stosowane w leczeniu nowotworów mogą zubażać pęcherzyki jajnikowe i zwiększać ryzyko wystąpienia uderzeń gorąca. Rycina 2 podsumowuje strategię kwalifikowalności dla początkowej rekrutacji uczestników.

Adresy pocztowe kobiet w wieku od 45 do 54 lat zamieszkujących obszar metropolitalny Baltimore, Maryland (USA) i okoliczne hrabstwa zostały zakupione od AccuData America (Fort Myers, FL, USA). Listy rekrutacyjne zostały następnie wysłane do adresów znajdujących się najbliżej ośrodka klinicznego w Johns Hopkins, Greenspring Station, a następnie w koncentrycznych kręgach od miejsca, aż do osiągnięcia docelowej liczby zapisanych. Aby uniknąć potencjalnych błędów w raportowaniu, badanie zostało przedstawione jako ogólne „Midlife Women’s Health Study”. Kobiety, które były zainteresowane włączeniem się do badania, proszono o telefon do kliniki w celu uzyskania dodatkowych informacji.

Gdy kobieta zadzwoniła do kliniki, pracownik kliniki ustalał, czy spełnia ona kryteria kwalifikacji. W oparciu o zainteresowanie kobiety i jej kwalifikowalność, zaplanowano wizytę w klinice podstawowej. Podczas tej wizyty ponownie poinformowano kobietę o ogólnym celu badania i udzielono odpowiedzi na jej pytania. Wszystkie uczestniczki wyraziły pisemną, świadomą zgodę zgodnie z procedurami zatwierdzonymi przez University of Illinois i Johns Hopkins University Institutional Review Boards, a każda kobieta otrzymała kopię formularza zgody.

Podczas wizyty w klinice podstawowej każda uczestniczka została poproszona o wypełnienie szczegółowego kwestionariusza badania podstawowego, oddanie próbek moczu i krwi do pomiarów hormonalnych, a także o zmierzenie masy ciała, wzrostu, obwodu talii i bioder oraz ciśnienia tętniczego. Ponadto u każdej uczestniczki wykonano przezpochwowe badanie ultrasonograficzne 2D w celu zmierzenia objętości jajników i liczby pęcherzyków. Generalnie, wizyty w klinice podstawowej zaplanowane były w godzinach porannych (8:30-10:00 rano), aby zminimalizować dzienne wahania poziomu hormonów u uczestniczek. Kobiety zostały również poinstruowane, aby pościć w ciągu nocy, aby uniknąć wszelkich potencjalnych efektów dietetycznych na poziom hormonów.

Każda uczestniczka została następnie poproszona o odwiedzenie kliniki raz w tygodniu w każdym z 3 tygodni następujących po wizycie podstawowej w celu dostarczenia dodatkowych próbek krwi i moczu. Podczas czwartej wizyty w klinice (ostatnia z trzech cotygodniowych wizyt następujących po wizycie podstawowej) każda z kobiet wypełniła również kolejny krótszy kwestionariusz. Dalsze szczegóły dotyczące kwestionariuszy są podane poniżej.

Podczas wizyt w klinice, członek personelu przejrzał każdy kwestionariusz pod kątem kompletności i zapisał wszystkie leki, które uczestniczka przyjmowała regularnie. Status uderzeń gorąca został przypisany przy użyciu odpowiedzi uczestnika na pytanie „Czy kiedykolwiek miała Pani uderzenia gorąca?” („tak” = kiedykolwiek doświadczyłaś uderzeń gorąca, „nie” = nigdy nie doświadczyłaś uderzeń gorąca). Po każdej wizycie uczestniczka otrzymywała 10 dolarów amerykańskich na pokrycie kosztów czasu i podróży do kliniki, a także otrzymywała kupon na przekąskę po badaniu krwi na czczo.

Te cztery kolejne cotygodniowe wizyty w klinice były następnie powtarzane co roku przez cały okres uczestnictwa kobiety w badaniu, przy czym wizyty przebiegały podobnie jak w pierwszym roku, jak opisano powyżej. Podczas tych wizyt personel kliniki badał wszelkie zmiany, które potencjalnie mogły wpłynąć na kwalifikację kobiety do dalszego udziału w badaniu. W szczególności zespół badawczy zaprzestał obserwacji kobiet, które zgłosiły, że aktualnie stosują terapię hormonalną, kiedykolwiek miały wykonaną ooforektomię i/lub histerektomię lub u których kiedykolwiek rozpoznano raka. Ogólnie rzecz biorąc, kobiety były obserwowane przez 4 lata, ponieważ pod koniec 4-letniej obserwacji stawały się kobietami w wieku pomenopauzalnym. Jednak niektóre uczestniczki były obserwowane przez okres dłuższy niż 4 lata, ponieważ nie były w okresie pomenopauzalnym pod koniec 4-letniej obserwacji.

W sumie wysłano 126 000 listów rekrutacyjnych, 2507 kobiet skontaktowało się z kliniką w celu uzyskania dodatkowych informacji i zostało przebadanych pod kątem kwalifikowalności. Spośród tych kobiet, w sumie 780 kobiet zostało zrekrutowanych i było aktywnymi uczestniczkami podczas pierwszego roku MWHS. Około 5,5% z 780 kobiet wycofało się po pierwszym roku, a około 3% zrezygnowało po każdym kolejnym roku. Niektóre z powodów wycofania się to brak czasu, problemy zdrowotne lub wyprowadzka z miasta. Zespół badawczy przerwał obserwację kobiet, które zgłosiły stosowanie terapii hormonalnej (n = 30), miały wykonaną ooforektomię i/lub histerektomię (n = 25) lub u których zdiagnozowano raka (n = 12). Rycina 3 przedstawia schemat przepływu kobiet zapisanych do badania.

Jeśli kobieta opuściła pojedynczą wizytę lub rok wizyt, nadal proszono ją o pozostanie w badaniu, a dane z tych pominiętych wizyt uznano za brakujące. Wreszcie, aby chronić prywatność uczestniczek, każda z nich otrzymała unikalny kod identyfikacyjny. Wszystkie akta i dane były przechowywane w zamkniętej szafce na akta w wyznaczonym biurze, a dostęp do nich miał tylko personel bezpośrednio zaangażowany w badanie.

Kwestionariusze

Podczas pierwszej wizyty i ostatniej wizyty w każdym roku uczestnictwa kobiety były proszone o wypełnienie kwestionariusza do samodzielnego wypełnienia, siedząc w prywatnym, wygodnym pokoju. Podczas pierwszej wizyty, uczestniczki wypełniły 20-stronicową, jednostronną ankietę, której wypełnienie zajęło około godziny. Ten szczegółowy kwestionariusz zawierał pytania dotyczące informacji demograficznych, historii reprodukcyjnej i charakterystyki cyklu miesiączkowego, przyjmowania hormonów i innych suplementów, objawów menopauzalnych, historii medycznej i rodzinnej oraz zachowań zdrowotnych, takich jak palenie tytoniu i spożywanie alkoholu.

Podczas ostatniej rocznej wizyty uczestniczki wypełniały skróconą wersję kwestionariusza (9 stron, jednostronnie zadrukowanych), której wypełnienie zajmowało około 30 min. W ankiecie tej oceniano jedynie czynniki, które mogły ulec zmianie w ciągu 2 do 4 tygodni (czas pomiędzy wizytami „w tym samym roku”). Na przykład, ankieta zawierała pytania dotyczące historii medycznej, historii uderzeń gorąca, historii palenia, podczas gdy czynniki takie jak data urodzenia i rasa zostały wyłączone ze skróconej wersji kwestionariusza.

Pomiary antropometryczne

W dniu każdej wizyty kobiety były ważone bez butów w ubraniu ulicznym z dokładnością do 0,05 kg, zaokrąglając w dół, na skalibrowanej wadze. Wzrost mierzono bez butów z dokładnością do 0,5 cm, zaokrąglając w dół, za pomocą standardowego stadiometru. Wskaźnik masy ciała (BMI) został obliczony przy użyciu internetowego kalkulatora BMI National Institutes of Health. Stan normalny, nadwaga lub otyłość zostały sklasyfikowane jako BMI poniżej 25 kg/m2, 25-29 kg/m2 i 30 kg/m2 lub więcej, odpowiednio. Obwód talii mierzony był w najwęższej części talii. Obwód bioder mierzono w najpełniejszej części bioder.

Pomiar objętości jajników i liczby pęcherzyków antralnych

Przezpochwowe badania ultrasonograficzne były wykonywane u każdej uczestniczki badania co roku przez licencjonowanego, wysoko wyszkolonego lekarza z Wydziału Ginekologii i Położnictwa Uniwersytetu Johnsa Hopkinsa. Wszystkie przezpochwowe badania ultrasonograficzne były wykonywane przy użyciu sondy przezpochwowej o częstotliwości 7,5 MHz na aparacie GE Logig 200 Alpha/Pro Model. Wszystkie pomiary przeprowadzono bez znajomości wieku kobiety, jej statusu menopauzalnego, czy statusu hot flash. Ocenę jajnika przeprowadzano skanując go od zewnętrznego do wewnętrznego brzegu. W każdym jajniku zmierzono i policzono wszystkie pęcherzyki o wielkości 2-10 mm. Wielkość pęcherzyków obliczano na podstawie 2 do 3 prostopadłych pomiarów. Objętość każdego pęcherzyka i jajnika obliczano stosując wzory na elipsoidę (LxWxDxpi/6). Całkowitą objętość jajnika uzyskiwano przez zsumowanie objętości obu jajników.

Pobieranie krwi i pomiar stężenia hormonów

Krew pobierano przez nakłucie żyły prowadzone przez wyszkolonego flebotomistę. Podwielokrotności próbek krwi pełnej były przechowywane w temperaturze -20 °C do przyszłych analiz genetycznych lub były dalej przetwarzane w celu ekstrakcji surowicy. W celu ekstrakcji surowicy, próbki były odwirowywane przy 2000 g przez 20 minut w schłodzonej wirówce. Po odwirowaniu, surowica została odessana i przechowywana w temperaturze -70 ° C do czasu analizy hormonalnej.

Ponieważ uczestniczki przechodziły przejście menopauzalne, miały nieregularne cykle podczas badania. Aby zminimalizować zmienność między pomiarami, próbki były pobierane od kobiet na czczo, o tej samej porze dnia, ale nie w tym samym dniu cyklu. Dodatkowo, w każdym roku badania zebrano cztery różne próbki krwi (jedna na tydzień w ciągu miesiąca). Wartości z tych próbek zostały uśrednione na rok w analizach statystycznych.

Stężenia estradiolu, testosteronu, progesteronu i globuliny wiążącej hormony płciowe (SHBG) w surowicy mierzono za pomocą testów immunoenzymatycznych (ELISA; DRG, NJ USA). Wszystkie oznaczenia zostały wykonane bez znajomości charakterystyki uczestników przez to samo laboratorium (Dr. Flaws, University of Illinois, Urbana, IL, USA). Każda próbka została oznaczona ilościowo w duplikacie w ramach tego samego badania. Niektóre próbki były badane wielokrotnie w celu zapewnienia, że wartości oznaczeń nie uległy drastycznej zmianie w czasie. Ogólnie, uśredniona zmienność między oznaczeniami wynosiła mniej niż 5%. Średnia wartość, na uczestnika, była używana we wszystkich analizach statystycznych. Kiedy poziomy hormonów uczestniczki były poniżej granicy wykrywalności, wartość pomiędzy zerem a granicą wykrywalności (w oparciu o rozkład równomierny) została losowo przypisana, aby zapewnić dokładniejsze oszacowanie wariancji.

Określenie statusu menopauzalnego

Stan menopauzalny został określony na podstawie odpowiedzi kobiet na kilka pytań kwestionariusza badawczego dotyczących historii cyklu miesiączkowego (np, wiek w momencie menarche, regularność cykli miesiączkowych i liczba cykli miesiączkowych w ostatnim roku). Kobiety w okresie przedmenopauzalnym to te, które doświadczyły ostatniej miesiączki w ciągu ostatnich 3 miesięcy i zgłosiły 11 lub więcej miesiączek w ciągu ostatniego roku. Kobiety w okresie okołomenopauzalnym to te, które miały ostatnią miesiączkę w ciągu ostatniego roku, ale nie w ciągu ostatnich 3 miesięcy lub miały ostatnią miesiączkę w ciągu ostatnich 3 miesięcy i ogólnie 10 lub mniej miesiączek w ciągu ostatniego roku. Kobiety po menopauzie to te, które nie miały miesiączki w ciągu ostatniego roku. W trakcie badania przerwano obserwację kobiet, które stały się pomenopauzalne (n = 120).

Zmienne dotyczące uderzeń gorąca

Szczegółowy wywiad dotyczący uderzeń gorąca uzyskano poprzez serię pytań w kwestionariuszach badania. Te szczegółowe pytania były używane do zbierania danych na temat uderzeń gorąca w poprzednich badaniach prowadzonych przez zespół MWHS przez ponad 12 lat. Kobiety zapytano: czy kiedykolwiek miały uderzenia gorąca; czy doświadczyły uderzeń gorąca w ciągu ostatnich 30 dni; liczba uderzeń gorąca doświadczonych w ciągu ostatnich 30 dni; wiek, w którym po raz pierwszy wystąpiły uderzenia gorąca; nasilenie i częstotliwość uderzeń gorąca; oraz długość czasu, w którym kobieta doświadczała uderzeń gorąca.

Silność uderzeń gorąca została sklasyfikowana jako umiarkowana lub ciężka, jeśli kobieta miała uderzenia gorąca, które zostały opisane jako uczucie gorąca, któremu towarzyszyło pocenie się, które może przerwać zwykłą aktywność. Kobieta została sklasyfikowana jako mająca łagodne uderzenia gorąca, jeśli miała uderzenia gorąca, które zostały opisane jako uczucie ciepła bez pocenia się lub zakłócania zwykłej aktywności. Częstość występowania uderzeń gorąca określono na podstawie szczegółowych pytań dotyczących występowania uderzeń gorąca. W szczególności, uczestnicy zostali zapytani, czy doświadczali uderzeń gorąca co godzinę, co 2-5 h, co 6-11 h, co 12-23 h, 1-2 dni w tygodniu, 5-6 dni w tygodniu, 2-3 dni w miesiącu, 1 dzień w miesiącu, mniej niż 1 dzień w miesiącu, lub nigdy.

Czas do osiągnięcia szczytowego nasilenia został obliczony jako różnica między wiekiem, w którym uderzenia gorąca były najbardziej dotkliwe, a wiekiem, w którym uderzenia gorąca były doświadczane po raz pierwszy. Domyślnie, szczytowe nasilenie było wiekiem, w którym zgłoszono największe nasilenie uderzeń gorąca podczas wizyty podstawowej. Jeśli w trakcie badania kobieta zgłosiła większe nasilenie w ankiecie niż w ankiecie z wizyty podstawowej, czas późniejszej ankiety uznawano za szczytowe nasilenie uczestniczki.

Dodatkowo kobiety pytano, czy jakiekolwiek inne krewne kobiety (np. matka, siostra, ciotka) doświadczały uderzeń gorąca. Wreszcie, kilka pytań dotyczyło jakości snu i uderzeń gorąca doświadczanych w nocy (tj. nocnych potów). Konkretnie, kobiety były pytane o występowanie, liczbę zdarzeń w ciągu nocy (częstotliwość) i nasilenie (potrzeba zmiany ubrań/pościeli w nocy i częstotliwość w typowym tygodniu) nocnych potów.

Aktywność seksualna

Aktywność seksualna została określona przez kilka pytań, które pytały czy uczestniczka była aktywna seksualnie, jej poziom satysfakcji w przypadku bycia aktywną seksualnie i powody braku aktywności seksualnej (związane z partnerem lub powody indywidualne). Podzbiór wyników wygenerowano na podstawie pozycji zawartych w Krótkim Kwestionariuszu Doświadczeń Osobistych, takich jak częstotliwość uprawiania seksu, przyjemność z seksu, podniecenie podczas seksu, orgazm podczas seksu, namiętność do partnera, zadowolenie z partnera, ból podczas seksu, lubrykacja podczas seksu i fantazje seksualne. Zmienna dla grupy wyników została utworzona, a wyniki uczestników zostały obliczone przy użyciu wartości skali Likerta („1” = wcale; „5” = bardzo dużo).

Nawyki dotyczące stylu życia

Poprzednie badania, w tym nasze wstępne badanie przekrojowe, wskazały, że palenie papierosów jest związane ze zwiększonym ryzykiem uderzeń gorąca. W MWHS status palenia papierosów został oceniony za pomocą pytań: „Czy kiedykolwiek paliłeś papierosy?” oraz „Czy nadal palisz papierosy?”. Status palenia papierosów został następnie skategoryzowany jako obecny, były i nigdy. Dla palaczy zbierano również informacje na temat częstości, ilości i rodzaju palenia.

Podobnie, dane na temat konsumpcji alkoholu były zbierane przy użyciu następujących pytań: „Czy w ciągu całego swojego życia wypił(a) Pan(i) co najmniej 12 drinków jakiegokolwiek napoju alkoholowego?” oraz „Czy w ciągu ostatnich 12 miesięcy wypił(a) Pan(i) co najmniej 12 drinków jakiegokolwiek napoju alkoholowego?”. Dalsze zapytania dla osób odpowiadających twierdząco na pytanie o wypicie co najmniej 12 drinków w ciągu ostatnich 12 miesięcy były wykonywane w celu oceny średniej liczby dni w miesiącu, w których kobieta piła oraz liczby drinków w te dni.

Aktywność fizyczną oceniano na podstawie odpowiedzi uczestnika na pytania dotyczące jego poziomu aktywności w pracy i w czasie wolnym. Obejmowały one pytania takie jak: „W pracy siedzę/stoję/chodzę/podnoszę duże ciężary/zmęczony/pocę się” , „W porównaniu z innymi osobami w moim wieku, uważam, że moja praca jest fizyczna” , „W porównaniu z innymi osobami w moim wieku, uważam, że moja aktywność fizyczna w czasie wolnym jest” oraz „W czasie wolnym uprawiam sport/oglądam telewizję/chodzę/jeżdżę na rowerze” .

Stan nastroju/emocjonalny

Doświadczanie objawów depresji oceniano za pomocą Skali Depresji Centers for Epidemiologic Studies (CES-D) . Kwestionariusz badania zawierał wiele pytań, w których kobiety proszone były o opisanie siebie podczas wizyty w poradni oraz w ciągu ostatniego tygodnia. Pytania te zawierały stwierdzenia, które najlepiej opisywały samopoczucie kobiety (np.: „byłam szczęśliwa”, „myślałam, że moje życie było porażką”, „miewałam napady płaczu”, „miałam trudności z utrzymaniem myśli na tym, co robię”). Uczestniczka była proszona o zaznaczenie najlepszego dopasowania na danej skali.

Inne wyniki zdrowotne

Kobiety zostały zapytane o historię choroby za pomocą serii kilku pytań. Pierwsze pytanie zawierało listę wybranych chorób/stanów medycznych, przy których uczestniczka miała zaznaczyć „Tak/Nie” oraz podać wiek pierwszego rozpoznania. Lista zawierała takie choroby/schorzenia jak: włókniaki macicy, cukrzyca, epilepsja, astma. Inne pytania przedstawiały inne objawy, które mogą wystąpić u kobiet w tej grupie wiekowej, takie jak nietrzymanie moczu, upławy, bóle głowy. Uczestniczka została poproszona o zaznaczenie, jak często doświadczała każdego z objawów w ciągu ostatniego roku. Wreszcie, członek personelu zapytał uczestniczki o stosowanie leków, a informacje te zostały udokumentowane oddzielnie.

Kwestionariusz zawierał również pytania dotyczące hormonalnej terapii zastępczej i suplementów ziołowych. Pozwoliło to na potwierdzenie, że uczestnicy nie przyjmowali środków hormonalnych lub ziołowych. Kwestionariusz zawierał również pytania dotyczące historii reprodukcyjnej uczestniczki (np. liczba ciąż, stosowanie doustnych środków antykoncepcyjnych).

Informacje ogólne

Stan zatrudnienia skategoryzowano jako zatrudniony (w pełnym lub niepełnym wymiarze godzin) i niezatrudniony. Dane dotyczące zawodu i całkowitego rocznego dochodu rodziny, stanu cywilnego, rasy/pochodzenia etnicznego i poziomu wykształcenia zostały również zebrane w szczegółowym kwestionariuszu podawanym podczas pierwszej wizyty każdego roku.

Poziomy metabolitów ftalanów

Ftalany można łatwo znaleźć w produktach higieny osobistej i są uważane za substancje chemiczne zaburzające gospodarkę hormonalną. Ponieważ kobiety prawdopodobnie używają tych produktów zawierających ftalany, podzbiór próbek od 195 uczestników (96 z uderzeniami gorąca i 99 bez uderzeń gorąca) został oceniony pod kątem poziomu metabolitów ftalanów w moczu. Aby zminimalizować potencjalne czynniki zakłócające, ten podzbiór próbek zawierał tylko niepalące i białe kobiety z podobnym BMI. Próbki moczu analizowano metodą rozcieńczenia izotopowego wysokosprawnej chromatografii cieczowej z ujemną jonizacją elektrospray’ową i tandemową spektrometrią mas (HPLC-MS/MS) w Environmental Health Laboratory & Trace Organics Analysis Center, School of Public Health na University of Washington. Szczegółowe metody są opisane przez Ziv-Gal et al.

Analizy statystyczne

W publikacjach MHWS, dane zostały przeanalizowane przy użyciu różnych podejść statystycznych. Podejścia te obejmowały, ale nie ograniczały się do analiz jedno- i dwuwariantowych, regresji logistycznej i uogólnionych szacunkowych modeli równań, analizy przeżycia i analizy sieci bayesowskich. Dla każdej analizy zbadano potencjalne modyfikatory efektu i czynniki zakłócające, jak opisano szczegółowo w opublikowanych manuskryptach.

.