Alai

Nasze długoterminowe cele to zbadanie mechanizmów wydzielania i działania sekretyny i cholecystokininy (CCK), aby lepiej zrozumieć fizjologię i patofizjologię tych dwóch hormonów jelitowych. Niniejszy projekt ma na celu sprawdzenie dwóch głównych hipotez: 1) uwalnianie sekretyny i cholecystokininy jest mediowane luminalnie przez czynniki uwalniające wydzielane z błony śluzowej górnego odcinka jelita cienkiego, a działania tych dwóch hormonów na wydzielanie egzokrynne trzustki są kontrolowane przez hormony wysepek trzustkowych, w tym insulinę, polipeptyd trzustkowy, somatostatynę i glukagon. Sok trzustkowy lub proteazy w górnym odcinku jelita cienkiego hamują uwalnianie zarówno CCK i/lub sekretyny, jak i wydzielania zewnątrzwydzielniczego trzustki w fazie międzyjelitowej i/lub jelitowej. Regulacja zwrotna wydzielania zewnątrzwydzielniczego trzustki obserwowana u szczurów, psów i ludzi ma charakter hormonalny. Obserwacje te sugeruj± obecno¶ć wrażliwych na trypsynę czynników uwalniaj±cych te dwa hormony. Czynniki uwalniające występują w wydzielinie górnego odcinka jelita szczura jako peptydy wrażliwe na trypsynę. Obecność tych czynników będzie dalej potwierdzana u szczura i psa. W pierwszej kolejności z perfuzatu lub wyciągu jelitowego szczurów i psów zostaną wyizolowane czynniki uwalniające sekretynę (S-RF) i oczyszczone do jednorodności. Zostanie określona ich struktura pierwotna. Następnie, czynniki uwalniające CCK (CCK-RF) zostaną wyizolowane i oczyszczone, a ich struktura zostanie określona. Oba czynniki zostaną zsyntetyzowane na zamówienie i opracowany zostanie ich specyficzny test radioimmunologiczny. Następnie zbadany zostanie mechanizm uwalniania S-RF i CCK-RF oraz ich działanie in vivo i in vitro. U przytomnych szczurów immunoneutralizacja krążącej insuliny za pomocą króliczej surowicy antyinsulinowej całkowicie hamuje wydzielanie zewnątrzwydzielnicze trzustki stymulowane płynnym posiłkiem lub egzogenną sekretyną i CCK-8. Hamuje również uwalnianie sekretyny i CCK. Wpływ insuliny na działanie sekretyny i CCK będzie badany u szczurów, psów i ludzi, a także u zwierząt i pacjentów z cukrzycą. Badania zostaną rozszerzone na izolowane modele perfuzji trzustki szczurów i psów zdrowych i chorych na cukrzycę w celu wyjaśnienia mechanizmu działania insuliny oraz roli 3 hormonów hamujących trzustkę w jej egzokrynnym funkcjonowaniu. Proponowane badania wzbogacą fundamentalną wiedzę na temat fizjologii i patofizjologii sekretyny i CCK oraz funkcji zewnątrzwydzielniczej trzustki, a także pomogą nam lepiej zarządzać pacjentami z upośledzoną funkcją trawienną i absorpcyjną oraz cukrzycą.