CK-MM Músculo Esqueleto Humano Imunopuro
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CK-MM Músculo Esqueleto Humano Purificado
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EC 2.7.3.2
Creatine kinase também é por vezes referida como creatina fosfoquinase, creatina fosfotransferase, CPK ou apenas CK. Todas as isoenzimas de CK catalisam a fosforilação da creatina para formar a fosfocreatina. Níveis muito altos de CK são encontrados no músculo esquelético, principalmente na forma MM. A fosfocreatina é usada como um sistema de armazenamento de energia no tecido muscular com CK servindo para catalisar a reação reversa: A rápida formação de ATP a partir da fosfocreatina e ADP quando o ATP é necessário pelo tecido1,
CK é uma enzima dimérica. Existem dois produtos genéticos comuns, um codificador para a subunidade (assim chamado devido à sua predominância no músculo) e o outro para a subunidade B (assim chamado devido à sua predominância no tecido cerebral). As três formas comuns de CK ativo incluem dois homodímeros e um heterodímero. O primeiro homodímero (CK-1) consiste em duas subunidades B e é referido como CKBB. O outro tem duas subunidades M e é referido como CKMM (CK-3). O heterodímero tem uma de cada subunidade e é referido como CKMB (CK-2)2. Existe um terceiro produto genético que resulta na forma mitocondrial de CK.
CKMM é um constituinte muito importante do músculo ativo, e tem demonstrado aumentar com exercício prolongado3. Além disso, ao medir CK total ou apenas CK sérico em soro normal, é realmente o CKMM que está sendo medido, pois é responsável pela grande maioria da atividade de CK normalmente encontrada no soro de adultos saudáveis4,5. Níveis significativos de atividade de CKMM também são encontrados no músculo cardíaco e, portanto, um grande aumento na CK total foi uma vez usado como uma ferramenta no diagnóstico de infarto agudo do miocárdio (IAM)6. Uma vez que as isoenzimas CK foram elucidadas e os testes de isoenzimas ficaram disponíveis, o CKMB rapidamente se tornou o marcador de escolha para o IAM, só para ser superado mais tarde pelas troponinas cardíacas. Entretanto, onde o CKMM (geralmente medido apenas como CK total) ainda tem um papel importante a desempenhar é nas patologias do músculo esquelético, incluindo o diagnóstico, monitoramento e avaliação do estado de portador de distrofia muscular7,8,9. CKMM também desempenha um papel útil no diagnóstico, prognóstico e monitoramento do tratamento de doenças musculares como polimiosite, dermatomiosite e na exclusão de outras como a polimialgia reumática10-13.
Não há alterações espectrofotométricas úteis que ocorrem durante a reação CK, mas uma forma muito comum de medir a atividade CK é acoplar a produção de ATP na reação reversa com glicose e hexoquinase que resulta em glucose-6-fosfato, que é então acoplado com sua reação desidrogenase (catalisada pelo G6PDH) que utiliza NADP, cuja redução pode ser monitorada por um aumento da absorvância a 340 nm. As isoenzimas CK possuem diferentes pontos isoelétricos e, portanto, podem ser facilmente distinguidas e quantificadas por eletroforese utilizando manchas cromogênicas de substrato.