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CK-MM Muscolo scheletrico umano Immunopure

CK-MM Muscolo scheletrico umano purificato

EC 2.7.3.2

La creatina chinasi viene anche chiamata a volte creatina fosfochinasi, creatina fosfotransferasi, CPK o semplicemente CK. Tutti gli isoenzimi di CK catalizzano la fosforilazione della creatina per formare fosfocreatina. Livelli molto alti di CK si trovano nel muscolo scheletrico, principalmente la forma MM. La fosfocreatina è usata come un sistema di immagazzinamento di energia nel tessuto muscolare con la CK che serve a catalizzare la reazione inversa: La rapida formazione di ATP da fosfocreatina e ADP quando l’ATP è necessario al tessuto1.

CK è un enzima dimerico. Ci sono due prodotti genici comuni, uno che codifica per la subunità (così chiamata per la sua predominanza nei muscoli) e l’altro per la subunità B (così chiamata per la sua predominanza nel tessuto cerebrale). Le tre forme comuni di CK attiva includono due omodimeri e un eterodimero. Il primo omodimero (CK-1) consiste di due subunità B e viene chiamato CKBB. L’altro ha due subunità M e viene chiamato CKMM (CK-3). L’eterodimero ha una di ogni subunità e viene chiamato CKMB (CK-2)2. C’è un terzo prodotto del gene che risulta nella forma mitocondriale di CK.

CKMM è un costituente molto importante del muscolo attivo, e ha dimostrato di aumentare con esercizio prolungato3. Inoltre, quando si misura la CK totale o solo la CK nel siero normale, è proprio la CKMM che viene misurata, poiché rappresenta la stragrande maggioranza dell’attività della CK che si trova normalmente nel siero di adulti sani4,5. Livelli significativi di attività CKMM si trovano anche nel muscolo cardiaco e quindi un grande aumento di CK totale era una volta usato come strumento nella diagnosi di infarto miocardico acuto (AMI)6. Una volta che gli isoenzimi CK sono stati chiariti e i test isoenzimatici sono diventati disponibili, CKMB è diventato rapidamente il marcatore di scelta per AMI, solo per essere superato più tardi dalle troponine cardiache. Tuttavia, laddove la CKMM (solitamente misurata solo come CK totale) ha ancora un ruolo importante da svolgere è nelle patologie del muscolo scheletrico, compresa la diagnosi, il monitoraggio e la valutazione dello stato di portatore della distrofia muscolare7,8,9. Il CKMM svolge anche un ruolo utile nella diagnosi, nella prognosi e nel monitoraggio del trattamento di malattie muscolari come la polimiosite, la dermatomiosite e nell’esclusione di altre come la polimialgia reumatica10-13.

Non ci sono utili cambiamenti spettrofotometrici che si verificano durante la reazione CK, ma un modo molto comune di misurare l’attività CK è quello di accoppiare la produzione di ATP nella reazione inversa con glucosio ed esochinasi che si traduce in glucosio-6-fosfato, che è poi accoppiato con la sua reazione deidrogenasi (catalizzata da G6PDH) che utilizza NADP, la cui riduzione può essere monitorata da un aumento di assorbanza a 340 nm. Gli isoenzimi CK hanno punti isoelettrici diversi e quindi possono essere facilmente distinti e quantificati mediante elettroforesi utilizzando colorazioni cromogeniche del substrato.