När man testar reglerade produkter som läkemedel (receptbelagda och receptfria), medicintekniska produkter, kosttillskott eller till och med kosmetika måste de använda testmetoderna uppfylla vissa prestandakrav, annars kommer de resultat som erhålls genom att använda metoderna inte att accepteras av tillsynsmyndigheter som FDA. För att avgöra om en analysmetod är tillförlitlig måste man genomföra en metodvalidering. Det bör noteras att metodvalidering, metodverifiering och metodöverföring inte bara gäller för testning av reglerade produkter, utan även för testning av de ingredienser som reglerade produkter består av och de behållare i vilka de distribueras.
Vad är metodvalidering?
I United States Pharmacopeia (USP) definieras metodvalidering som en process genom vilken man genom laboratoriestudier fastställer att prestandaegenskaperna hos en metod uppfyller kraven för de avsedda analytiska tillämpningarna. USP anger vidare att metodvalidering vanligtvis utvärderar följande analytiska egenskaper hos en metod: Noggrannhet, precision, specificitet, detektionsgräns, kvantifieringsgräns, linjäritet, intervall och robusthet. Beroende på typen av metod och dess tillämpning kommer inte alla de analytiska egenskaper som anges ovan att krävas för validering.
Precision avser hur nära det sanna värdet ligger hos de testresultat som erhålls med en analysmetod. En metods noggrannhet måste bestämmas över hela dess tillämpningsområde.
Precision definieras som graden av överensstämmelse mellan enskilda testresultat när metoden tillämpas upprepade gånger på flera provtagningar av ett homogent prov.
Specificitet är en metods förmåga att entydigt bedöma analyten i närvaro av komponenter som förväntas förekomma, t.ex. föroreningar, nedbrytningsprodukter, andra beståndsdelar och andra möjliga matrisinterferenser.
Detektionsgräns är en egenskap som tillämpas på gränstest och avser den lägsta mängden analyt i ett prov som kan detekteras, men inte nödvändigtvis kvantifieras.
Kvantifieringsgräns är en egenskap hos kvantitativa tester för låga nivåer av föreningar i provmatriser, t.ex. föroreningar och nedbrytningsprodukter. Det är den lägsta mängden analyt i ett prov som kan bestämmas med metoden med godtagbar precision och noggrannhet.
Linearitet är en metods förmåga att generera resultat som är direkt proportionella mot koncentrationen av analyten i proverna över hela metodens tillämpningsområde.
En analysmetods intervall definieras som intervallet mellan den övre och den nedre nivån av analyten som ger lämplig precision, noggrannhet och linjäritet.
Robusthet är ett mått på en metods förmåga att förbli opåverkad av små men avsiktliga variationer i förfarandets parametrar.
Specifika uppgifter om metodvalidering finns i USP:s allmänna kapitel <1225> med titeln ”Validation of Compendial Procedures”.
Måste USP-metoder valideras?
Det finns inget generellt krav på att USP-metoder ska valideras eftersom de validerades framgångsrikt innan de infördes i USP. Det krävs dock att USP-metodernas lämplighet bestäms under faktiska användningsförhållanden, dvs. för det specifika prov som ska testas och av det laboratorium som utför testningen. USP-metoder och kompendiemetoder i allmänhet (t.ex. BP och EP) måste verifieras.
