Hållning och odling av bakterier
De vanligaste färgningarna
Simpel färgning
Gramfärgning
Eftersom bakterier är små, genomskinliga och färglösa är det ofta omöjligt att se dem i mikroskopet utan någon slags färgning. En färgning är ett utmärkt sätt att färga bakterierna så att de blir lättare att se, samt att identifiera och organisera dem. Det finns två huvudtyper av färgningar som du kan göra på bakterier – en enkel färgning och en Gram-färgning.
I en enkel färgning vill du montera bakterier på ett objektglas med hjälp av korrekt smetningsteknik. Detta säkerställer att du har ett tunt lager och bara en liten mängd, annars blir det mycket svårt att hitta i mikroskopet. Därefter ska du färga bakterierna med en färg. Vanliga färgämnen är metylenblått, kristallviolett och basiskt fuchsin. Färgämnena har speciella celler som kallas kromoforer, som är färgbärande joner och tenderar att vara svagt positiva. Bakterier tenderar att vara svagt negativa, så de två attraheras, vilket gör att färgämnet fastnar på bakterierna. Denna färgning används främst för att se organismerna bättre.
Däremot kan man också använda en Gram-färgning. Christian Gram skapade gramfärgen 1884 och den har använts sedan dess. Gram-färgningen placerar organismer i två kategorier – Gram-positiv eller Gram-negativ. Gram positiv blir lila eller blå, medan Gram negativ blir rosa eller röd. Färgen kristallviolett används för att färga organismerna, och du kan hitta grundläggande egenskaper hos organismen baserat på vilken färg den får. Den största skillnaden mellan de två grupperna bygger på vad deras cellväggar består av. Grampositiva bakterier har en cellvägg som består av peptidoglykan, medan gramnegativa bakterier har en cellvägg som består av polysackarider och lipider. Även om denna färgning är ett bra första steg för att organisera och placera bakterier i grupper fungerar den inte alltid. Det finns flera bakterier som kan färga både negativt och positivt, och andra färgar inte alls.
Som du kan se på bilderna blir gramnegativa bakterier röda (till höger) och grampositiva bakterier blåa eller lila (till vänster).