För att kloroplasten ska kunna syntetisera triosfosfat krävs tre substrat: ljus, koldioxid och ortofosfat (Pi). Vid responsen av kolassimileringshastigheten på koldioxidkoncentrationen utgör de kinetiska egenskaperna hos RuBP-karboxylas-oxygenas (Rubisco) den huvudsakliga begränsningen vid låga koldioxidkoncentrationer, medan begränsningen vid högre koldioxidkoncentrationer förskjuts till de reaktioner som leder till regenerering av substratet RuBP, som drivs av elektrontransport. Under dessa omständigheter kan ljus eller Pi, eller båda, bli begränsande. De egenskaper hos Rubisco som kan påverka fotosyntesen kan delas in i tre huvudrubriker: (1) mängd och kinetiska konstanter, (2) aktiveringstillstånd och (3) reglering av katalysen (inklusive rollen för effektorer som Pt och glycerat-3-fosfat (PGA)). Dessa egenskaper analyseras, och betydelsen av förändringar i enzymets aktivitet diskuteras i samband med begränsning och reglering av fotosyntesprocessen. Andra faktorer som beaktas är regenerering av RuBP och dess förhållande till elektrontransport, Pi-försörjning och fotorespiration. Det diskuteras vilket inflytande förväntade ökningar av koldioxidkoncentrationen i atmosfären och/eller genetiska förbättringar av enzymets egenskaper kan ha på den nuvarande balansen mellan fotosyntesens delprocesser.